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辛伐他汀对谷氨酸诱导海马神经元损伤的保护作用 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：辛伐他汀对谷氨酸诱导海马神经元损伤的保护作用 1 1 材料与方法 2 2 结 果 3 3 讨 论 4 文2：辛伐他汀对缺血再灌注损伤大鼠肾脏的保护作用 6 1 材料与方法 6 2 结果 8 3 讨论 9 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 12 正文 辛伐他汀对谷氨酸诱导海马神经元损伤的保护作用 文1：辛伐他汀对谷氨酸诱导海马神经元损伤的保护作用 他汀类药物是一类主要抑制胆固醇合成的药物，临床常用于 治疗 高胆固醇血症和冠心病的一级和二级预防。近年来，不断有研究证实，他汀类药物还具有许多不依赖于胆固醇水平的保护作用，如改善血管内皮细胞功能、抗氧化、抑制血栓形成、抗炎等〔1，2〕，均有益于预防和治疗心脑血管疾病。新近发现长期服用他汀类药物不仅能降低脑卒中的危险性，而且能改善脑卒中的预后〔3〕，且具有神经保护作用〔4，5〕。鲜有 文献 报道他汀类药物对谷氨酸造成的氧化性神经损伤的影响。本实验通过给大鼠侧脑室注射谷氨酸建立神经损伤模型，观察辛伐他汀对谷氨酸诱导的海马神经元损伤的影响，探讨其神经保护作用。 1 材料与方法 实验动物 4～5月龄健康雄性Wistar大鼠(200±20)g，SPF级，合格证号：SCXK(鲁)，山东大学实验动物中心提供。 试剂及仪器 辛伐他汀(山东鲁抗医药集团公司，批号050833);谷氨酸(美国Sigma公司);丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)、羟自由基检测试剂盒(南京建成生物试剂公司);其他试剂均为分析纯;脑立体定位仪(江湾Ⅰ型，第二军医大学);多功能酶标仪(VarioskanTM，Thermo Electron Corporation);电热恒温水浴锅(上海医疗器械三厂);TGL16G型冷冻离心机(上海安亭 科学 仪器厂) 方法 建立侧脑室注射谷氨酸致大鼠脑损伤模型 大鼠经尾静脉注射硫喷妥钠(25 mg/kg)麻醉后，固定于脑立体定位仪上，消毒大鼠头部皮肤，然后切开颅顶正中皮肤及骨膜，清晰暴露前囟，在前囟后 mm，矢状缝右侧旁开 mm处钻开颅骨，用微量注射器向侧脑室注射谷氨酸4 μl(1 mg/kg)〔6〕，进针深度 mm，留针5 min。取针后观察大鼠行为学改变，以出现癫痫样发作的表现为模型成功。 分组及给药 将68只大鼠随机分为假手术组、谷氨酸损伤组、辛伐他汀低和高剂量组(10、20 mg/kg)。假手术组、谷氨酸损伤组均以生理盐水灌胃，辛伐他汀低、高剂量组分别用%、%的辛伐他汀溶液按5 ml/kg灌胃，连续给药10 d，最后一次灌胃后1 h，谷氨酸损伤组及辛伐他汀低、高剂量组均按上述方法行侧脑室注射谷氨酸，假手术组于侧脑室注射生理盐水4 μl。留针5 min后，观察大鼠行为学改变。 海马组织匀浆生化指标检测 每组各取12只大鼠于侧脑室注射谷氨酸溶液2 h后断头处死，迅速取全脑，分离海马，称重，在冰浴中加入生理盐水制备成10%的组织匀浆。严格按照试剂盒说明书操作，用多功能酶标仪检测MDA含量、SOD 和GSHPx活性及产生羟自由基的能力。 海马组织病理形态学观察 在注射谷氨酸溶液2 h后，每组各取5只大鼠用4%多聚甲醛灌流，然后断头处死。取全脑，在前囟后 mm至前囟后 mm处取出海马，石蜡包埋，切片，常规HE染色，观察病理形态学改变。 统计学处理 使用SPSS 软件进行统计学分析，数据以x±s表示，组间比较采用单因素方差分析和t检验。 2 结 果 辛伐他汀对MDA含量和羟自由基生成的影响 与假手术组相比，谷氨酸损伤组大鼠海马组织中MDA含量和羟自由基的生成显著升高(P);与谷氨酸损伤组比较，辛伐他汀高剂量组MDA含量降低(P)，羟自由基生成减少(P)。见表1。 辛伐他汀对SOD和GSHPx活性的影响 与假手术组相比，谷氨酸损伤组大鼠海马组织中SOD和GSHPx的活性显著降低(P，P);与谷氨酸损伤组比较，辛伐他汀显著升高SOD和GSHPx的活性(P)。见表2。 大鼠海马组织病理形态学变化 HE染色结果显示，假手术组大鼠海马锥体细胞呈圆形或椭圆形，细胞体较大，色质分布均匀，核仁明显，细胞与周围组织联系紧。未见神经细胞、胶质细胞等形态学改变，无充血水肿及脑软化灶等改变。谷氨酸损伤组海马神经细胞明显变性，部分细胞体积缩小，核不规则，多呈三角形，胞浆变红，核模糊不清，核固缩或消失，神经细胞明显变少。辛伐他汀高剂量组海马锥体细胞排列疏松，可见到部分神经细胞胞体缩小，形态不规则，胞膜皱缩，轻度变性，少数神经细胞核固缩或消失，有个别神经元