卵巢癌组织中尿激酶型纤溶酶原激活物与骨桥蛋白表达的意义临床医学.docVIP

卵巢癌组织中尿激酶型纤溶酶原激活物与骨桥蛋白表达的意义临床医学 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：卵巢癌组织中尿激酶型纤溶酶原激活物与骨桥蛋白表达的意义临床医学 1 1 材料与方法 2 2 结 果 3 3 讨 论 3 文2：关于卵巢癌组织中uPA与PAI1mRNA表达及意义 5 1 资料与方法 6 1. 2 方法 6 1. 3 统计学处理 7 2 结　　果 7 3 讨　　论 8 参考文摘引言： 9 原创性声明（模板） 10 文章致谢（模板） 11 正文 卵巢癌组织中尿激酶型纤溶酶原激活物与骨桥蛋白表达的意义临床医学 文1：卵巢癌组织中尿激酶型纤溶酶原激活物与骨桥蛋白表达的意义临床医学 恶性肿瘤的浸润、转移是个复杂的过程，包括肿瘤细胞的增殖、从原发部位脱落、黏附继发部位、降解基质、新生血管形成、转移灶形成等。研究表明，尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA) 是一种丝氨酸蛋白酶，对细胞的迁移和肿瘤浸润、转移起着重要作用，其活性与肿瘤的恶性生物学行为密切相关〔1，2〕;而骨桥蛋白(osteopontin，OPN)是近年来发现的一种糖磷酸化蛋白，是一种与转移相关的蛋白，能够促进肿瘤组织细胞的生存、增殖和迁移，参与肿瘤组织中毛细血管床的形成，在肿瘤的发生、 发展 及转移过程中发挥着重要作用〔3～5〕。本研究观察卵巢肿瘤中uPA和OPN的表达，探讨其与临床病理特征的关系。 1 材料与方法 一般资料 选取卵巢癌患者的癌组织标本67例，年龄33～71岁，平均(±)岁。其中黏液性囊腺癌28例，浆液性囊腺癌39例;按国际妇产科联盟(FIGO，2000年)临床分期Ⅰ期14例，Ⅱ期21例，Ⅲ期24例，Ⅳ期8例;高分化14例，中分化22例，低分化31例。所有标本均经病理证实，且均未经放疗、化疗或其他 治疗 。同时选取卵巢良性肿瘤23例，正常卵巢组织20例。 方法 标本均在癌灶中央常规取材，福尔马林固定，石蜡包埋，4 μm厚连续切片4张，进行HE染色及免疫组化研究。兔抗人OPN多克隆抗体购自Neomarke公司，兔抗人uPA多克隆抗体及SP免疫组化试剂盒购自武汉博士德生物技术有限公司，实验操作按说明书进行。抗OPN和抗uPA按1∶100和1∶50稀释，每批染色均用已证实的OPN和uPA染色阳性乳癌切片作阳性对照，同时用PBS替代一抗作阴性对照。 判定标准 采用低倍镜和高倍镜观察切片。阳性反应判定：①按切片中显色癌细胞数比例计分：0分，无细胞显色;1分，显色细胞占细胞总数25%;2分，显色细胞占细胞总数的25%～50%;3分，显色细胞超过切片中细胞总数的50%。②按切片中癌细胞显色强度计分：0分，细胞无显色;1分，呈浅黄色(弱染色);2分，呈棕黄色(中等染色);3分，呈棕褐色(强染色)。①+②3分记为阳性，≤3分记为阴性。 统计学处理 采用统计软件进行检验。 2 结 果 uPA和OPN在不同卵巢组织中的表达及其相关性分析 见表1。OPN蛋白阳性颗粒主要位于肿瘤细胞的胞浆内，uPA蛋白则主要定位于细胞膜或胞浆中，阳性物质为黄棕色颗粒状。uPA、OPN在卵巢癌中的阳性表达率分别为%和%，uPA、OPN在卵巢癌组织中的表达与卵巢良性肿瘤、正常卵巢组织中的表达比较均有显著性差异(P)。而OPN、uPA在卵巢浆液性囊腺癌及黏液性囊腺癌中的阳性表达率无统计学差异。表1 uPA及OPN蛋白在不同类型的卵巢组织中的表达与卵巢癌比较：1)P 卵巢癌组织中uPA与OPN表达的关联性分析 见表2。卵巢上皮癌中37例OPN与uPA同时表达，10例不表达，OPN与uPA表达之间存在正相关(P)。表2 卵巢上皮癌组织中OPN与uPA表达的关联性分析 uPA、OPN在卵巢癌中的表达与临床病理特征的关系 见表3。uPA在组织学低分化组的表达明显高于高中分化组(P);但与淋巴结转移无关，晚期(Ⅲ～Ⅳ期)uPA表达的表达率高于早期(I～Ⅱ期)(P)。OPN在组织学低分化组的表达明显高于高中分化组(P);但与淋巴结转移无关，OPN表达在临床晚期(Ⅲ～Ⅳ期)高于早期(I～Ⅱ期)(P)。表3 OPN、uPA在卵巢癌中的表达与临床病理特征的关系〔n(%)〕与低分化比较：1)P，与Ⅲ～Ⅳ期比较：2)P 3 讨 论 恶性肿瘤转移过程包括一系列相关步骤，其中以细胞外基质及基底膜的降解为最关键，它需要一系列蛋白溶解酶参与〔1，2〕。uPA介导的纤溶酶原激活系统参与细胞的分化、迁移、组织重建、基质降解等多种生理病理过程。肿瘤组织中uPA能特异激活纤溶酶原转化为纤溶酶，降解肿瘤细胞外基质和基底膜成分(纤维蛋白、纤维连接蛋白、蛋白多糖和Laminin)，使肿瘤细胞易发生侵袭、转移〔1，