老年胆固醇结石患者载脂蛋白E基因多态性分析.docVIP

老年胆固醇结石患者载脂蛋白E基因多态性分析 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：老年胆固醇结石患者载脂蛋白E基因多态性分析 1 1 材料与方法 2 2 结 果 4 3 讨 论 4 文2：血管性痴呆载脂蛋白E基因多态性检测及其意义 5 1 资料与方法 6 2 结果 6 3 讨论 7 4 参考文献 8 参考文摘引言： 8 原创性声明（模板） 10 文章致谢（模板） 10 正文 老年胆固醇结石患者载脂蛋白E基因多态性分析 文1：老年胆固醇结石患者载脂蛋白E基因多态性分析 【Abstract】 Objective To study the relatiohip between the polymorphisms of apolipoprotein E (ApoE) and cholesterol calculus in the elderly. Methods The polymerase chain reactionrestriction fragment length polymorphism (PCRRFLP) technique was used to investigate the polymorphisms of ApoE gene and allele frequencies in 92 elderly patients with cholesterol calculus and 98 healthy elderlys as control. Results The apoE3/4 andε4 allele polymorphism frequencies in cholesterol calculus group were higher than those in control group (% vs %, % vs %, respectively, P). Conclusio Apolipoprotein E gene polymorphisms are relative to cholesterol calculus and allele ε4 is a risk factor in elderly cholesterol calculus patients. 【Key words】 Apolipoprotein E; Cholesterol calculus; Allele 胆固醇结石是临床上一种常见病、多发病;胆固醇结石的发病率随年龄的增长而逐渐增高，中老年人发病率明显高于青年人;胆固醇结石形成的机制主要与胆汁胆固醇的高分泌、成核，以及胆囊动力缺陷三方面有关;因此与体内脂质代谢、成核，以及胆囊动力密切相关的基因成为研究的重点〔1～3〕。Juvonen等〔4〕研究发现，由于载脂蛋白E(ApoE)基因多态性基因表现型不同，影响胆固醇单水结晶的形成，ε4等位基因具有成核作用，ε4型胆囊结石患者胆汁成核时间比ε2型及ε3型明显缩短。另有研究表明，含有不同ApoE异构体的脂蛋白，因具有不同的代谢动力学而与血脂质水平变化密切相关〔1～3，5〕。流行病学调查表明，胆固醇结石与家族遗传因素有关〔6，7〕;为进一步探讨ApoE基因多态性与老年胆囊胆固醇结石的关系，本文应用聚合酶链反应——限制性片段长度多态性分析方法(PCRRFLP)技术检测92例老年胆囊胆固醇结石患者和98例健康老年人的ApoE基因多态性及等位基因频率，探讨ApoE基因多态性在老年胆固醇结石发病中的意义。 1 材料与方法 研究对象 胆固醇结石组选自本院2006年5月至2008年11月住院择期手术后的胆囊结石病患者，结石成份分析显示胆固醇的含量在50%以上。共计92例，其中男性42例，女性50例，年龄68～89岁，平均(75±)岁。正常对照组为同期本院健康体检者，经B超证实为无胆囊结石及肝内外胆管结石98例，其中男性52例，女性46例，年龄66～91岁，平均(76±)岁。排除心血管系统疾病、高脂血症、糖尿病、肥胖症和甲状腺疾病，恶性肿瘤，以及肝、胆、胰和肾疾病等。 引物的设计、合成及相关试剂 ApoE基因引物参照 文献 〔8〕,上游p1:5′AACAACTGACCCCGGTGGCG3′;下游p2:5′ATGGCGCTGAGGCCGCGCTC3′由Invitrogen公司合成，DNA提取试剂盒购自Invitrogen公司，Taq酶和HhaⅠ内切酶购自Promega公司。 方法 基因组DNA提取 采取外周静脉全血2 ml，EDTA抗凝，取300 μl抗凝全血，用DNA提取试剂盒(Genomic DNA Purification Kit)