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结肠癌患者外周血内皮祖细胞数量及其功能的变化 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：结肠癌患者外周血内皮祖细胞数量及其功能的变化 1 1 对象与方法 2 2 结果 4 3 讨论 5 文2：COPD并发肺动脉高压病人外周血内皮祖细胞数量和功能的变化医学 6 1 对象和方法 7 2 结 果 9 3 讨 论 9 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 12 正文 结肠癌患者外周血内皮祖细胞数量及其功能的变化 文1：结肠癌患者外周血内皮祖细胞数量及其功能的变化 【Abstract】Objective To investigate changes in the number and activity of endothelial progenitor cells (EPCs) from peripheral blood in the patients with colon Peripheral blood mononuclear cells were isolated by deity gradient centrifugation from colon cancer patients(n=32) and control subjects (n=34).Immunocytochemical analysis was conducted after 14 d induced differentiation，the expressio of the endothelial cellspecific components ecNOS and flk1/KDR were detected with RTPCR，the cells were stained with acLDLDil and FITCUEA1；EPC number and migration were measured by colony forming unitEPCs (CFUEPCs) assay，modified Boyden chamber assay， adhesion assay was performed by replating those on fibronectincoated dishes to count adherent The number of EPCs in colon cancer group was significantly higher than that in control subjects addition，the adhesion and proliferation avtivity of EPCs with colon cancer increased EPCs numbe and activity are abnormally increased in patients with colon cancer. 【Key words】Colon cancer；Endothelial progenitor cells；Angiogenesis 结肠癌在我国的发病率与死亡率次于胃癌、食管癌、肺癌等常见恶性肿瘤，居第4～6位，且其发病率有逐年上升趋势〔1〕。随着人们年龄的增长发病率有所增高。近年研究表明，血管内皮祖细胞(EPCs)出生后主要存在于骨髓，在某些情况下可以被动员到外周血，归巢到靶组织参与生理或(和)病理性血管形成。外周血EPCs参与肿瘤血管新生，而肿瘤新生血管系统对肿瘤发生、 发展 及转移起关键作用。本文拟通过观察结肠癌病人外周血EPCs的数量及迁移、黏附能力的变化，探讨其在结肠癌发病机制中的作用，为其 治疗 探索新的途径。 1 对象与方法 研究对象 选择2007年10月～2008年11月我院住院结肠癌病人32例，其中男18例，女14例；年龄51～73(平均±)岁；排除外伤、溃疡、视网膜病、近期外科手术、炎症、肿瘤等影响EPC疾病者，近3个月无急性心肌梗死发生，入选病人均未用过他汀类药物。另选取我院体检健康者34例为正常对照组，其中男19例，女15例，年龄50～75(平均±)岁。 EPCs分离、培养 无菌环境取患者外周静脉血，用密度梯度离心法分离单个核细胞，加入M199细胞培养液重悬细胞，计数细胞总数并进行细胞活力鉴定。将其接种于包被人纤维连接蛋白的培养皿，置于5% CO2饱和湿度培养箱中培养。3 d后换液，弃掉未贴壁细胞。此后每隔3 d更换1次培养液。 内皮细胞特异性成分基因水平鉴定〔2〕 将EPCs诱导培养14 d后，RTPCR法检测内皮细胞特异性成分内皮源型