睾丸生精功能局部调节因素的改变对衰老大鼠生精功能的影响临床医学.docVIP

睾丸生精功能局部调节因素的改变对衰老大鼠生精功能的影响临床医学 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：睾丸生精功能局部调节因素的改变对衰老大鼠生精功能的影响临床医学 1 1 材料与方法 2 2 结果 5 3 讨论 5 文2：环孢素对大鼠睾丸生精功能自身免疫反应损伤的保护作用 7 1 材料和方法 8 2 结果 10 3 讨论 11 参考文摘引言： 12 原创性声明（模板） 13 文章致谢（模板） 14 正文 睾丸生精功能局部调节因素的改变对衰老大鼠生精功能的影响临床医学 文1：睾丸生精功能局部调节因素的改变对衰老大鼠生精功能的影响临床医学 【Abstract】Objective To explore the effects of local regulation facto changes, such as testosterone (T), IGF1 and EGFR, on spermatogenic function of aging rats. Methods The subacutely aging model rats were made by injecting Dgal into abdominal cavity continually. Radioimmunity was used to detect the T level in serum, immunohistochemical method and in situ hybridization were used to detect the expression of EGFR and IGF1 mRNA in testes respectively. Sperum counts, motility and survival rate were detected. Results Compared with normal rats, the T level in serum of aging rats, the expression of EGFR and IGF1 mRNA in testes of aging rats decreased significantly (P＜). Sperum motility, survival rate and counts of aging rats were lower (P＜). Conclusio Local regulation facto changes, such as EGFR, IGF1 mRNA and T level in serum, can affect spermatogenic function of aging rats. 【Key words】Testis; IGF1; EGFR; Testosterone 精子发生是生精细胞在不同的内分泌激素和旁分泌因子作用下，不同基因以特定的时空程序精确有序地表达和相互作用的结果，并受神经内分泌和局部调节。Leydig 细胞分泌的睾酮是启动和维持精子发生的最重要的激素。睾丸Leydig 细胞、Sertoli细胞和肌样细胞分泌多种因子如：表皮生长因子(EGF)、胰岛素样生长因子1(IGF1)等对精子发生均具有调节作用〔1～3〕。人的衰老与性腺结构和功能的退化有密切关系，从50岁开始，男性睾丸组织就出现退行性改变，并出现结构的萎缩和功能的退化。衰老大鼠血清睾酮以及睾丸组织IGF1、EGF表达的改变对睾丸生精功能的影响尚未见报道，本实验通过对大鼠血清睾酮含量的检测；对睾丸组织IGF1 mRNA 和EGFR表达的观察，初步探讨了睾丸生精功能局部调节因素的改变对衰老大鼠生精功能的影响。 1 材料与方法 动物 实验选用8周龄清洁级SD雄性大鼠20只(由北京大学医学部实验动物 科学 部提供)，体重180～220 g，随机分为：正常组，模型组，各10只。正常组连续腹腔注射生理盐水60 d，每天1次；模型组用生理盐水配6%的D半乳糖溶液，连续腹腔注50 d，按300 mg·kg-1·d-1给药，每天1次，制作亚急性衰老动物模型。 药品与试剂 EGFR抗体购自北京中杉金桥生物有限公司；IGF1原位杂交检测试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司；睾酮购自 中国 人民解放军放免技术中心；D半乳糖购自北京化学试剂公司。 标本处理 将大鼠用4%多聚甲醛灌注，取双侧睾丸，放入4%多聚甲醛中(原位杂交的标本用含有1∶1 000 DEPC的4%多聚甲醛， mol/L PBS，，固定2 h)4℃冰箱过夜，常规石蜡包埋，连续切片，贴附于APES浸泡过