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学生海外学习总结 0810106 张慧燕水产与生命学院 08 动课 (1) 班本人于 2011 年 4 月至 2012 年 3 月经上海海洋大学选派到日本北海道大学进行 1 年的交换学习生活。期间完成了 我选修了 2 学期共 24 个学分的北海道大学水产学部的本科课程同时还完成大学本 科毕业论文的实验部分。在此非常感谢上海海洋大学给了我这次宝贵的交换留学机 会。 交换学校的具体地址是日本北海道 , 函馆市的北海道大学水产学院。在这一年的时间里我有幸经验的很多只有在日本才能感受到的特殊事情。例如和实验的学长还有大家一起到小酒馆。吃日本料理 , 生鱼片、天布拉、拉面等等。其次还参观了 函馆市的著名旅游景点——函馆山 , 我们一行 3 人共花费 2 小时从山下爬至山顶 , 函馆山下遍布了土特产和买礼物的小店 , 这个地方原来是港湾的仓库 , 现在改造为了商 店街。随着夕阳西下 , 天色逐渐变暗 , 地面上家家户户的电灯逐渐点亮 , 由于函馆市地处北海道最南边的港湾 , 其独特的鱼尾造型 , 使其上脚下的夜景在灯光的点缀下极其宏大 , 不愧为世界第三大夜景。十二月 , 我在当地中日友好学会的邀请下参加了试 穿和服的体验活动。在此之前 , 只有看电视上看到过和服 , 穿着真实的和服是从来都没有的。穿着和服是一个极为复杂的过程 , 一共有 2 个人同时帮你穿上一层又一层的衣服以及包裹上一层有一层的毛巾。从 7 月至 9 月, 我每周一次在日本学长的陪同下到当地的牙医诊所治疗蛀牙 , 因为日语还不是很好。日本牙医的治疗技术的很 , 首次看诊医院会帮你把所有的牙齿都检查一遍 , 包括还会拍摄 X 光片。只是其治疗周期很长 , 每次只给医治一颗牙齿 , 而且牙疼的时候还不给治疗。函馆市的市民也 很热心 , 我在路上迷路时 , 经常询问当地路人 , 路人总是很友好的给我指出正确的道路 , 还有热心者甚至拿出纸和笔话给我看正确的路线 , 实在是相当的负责。 我所在的实验室是北海道大学水产学院生理学实验室。我在实验室的主要学习任务是完成大学毕业论文的实验部分 , 实验指导老师是生理学实验室的教授都木靖彰老师。我毕业论文的题目是环境温度对鲤鱼和金鱼胶原蛋白性状的影响。所以我在生理实验室主要学习鱼类胶原蛋白的提取纯化方法 , 以及胶原蛋白的分析检验 方法 , 其主要方法分为预处理和提取。首先是预处理 , 称取一定重量的组织 ( 鱼鳞或鱼皮 ) 于烧杯 , 用 10 倍组织重量的 15℃的去离子清洗 3 次。用移液枪除去所有去离子水 , 加入 10 倍量的 15℃的 0.1M NaOH,放于搅拌器上 , 搅拌 3 小时 ,3 小时后更换 一次 NaOH。总共处理 6 小时。完成除去鱼鳞的非胶原蛋白物质后 , 用鱼鳞重量 10 倍量的 15℃的去离子清洗 3 次。用移液枪除去所有去离子水 , 加入 10 倍量的 15℃ 的 0.5 M EDTA (pH 8.0), 放于搅拌器上 , 搅拌 3 小时 ,3 小时后更换一次 EDTA。总共处理 6 小时。此操作在 15℃的恒温箱中进行。最后加入 AgNO3查看鱼鳞是否变黑 , 未变黑说明脱灰完成。完成除去鱼皮中的非胶原蛋白物质后 , 用去离子清洗后。 加入 10 倍量的 15℃的浓度 99%的酒精 , 放于搅拌器上 , 搅拌 6 小时 , 每隔 6 小时更换一次酒精 , 共更换 4 次 , 总共处理 24 小时。此操作在 15℃的恒温箱中进行。然后是 提取方法 , 主要是完成脱脂后的鱼皮和脱灰后的鱼鳞 , 先用 15℃去离子水清洗一 夜。然后加入组织重量 10 倍量的 HCl(pH 2.0) 和组织重量 1%的猪胃蛋白酶 , 放于搅 拌器上 , 在 15℃的恒温箱中对其进行消化。鱼鳞消化 48 小时 , 鱼皮消化 24 小时。 结束消化后 , 鱼鳞消化后 , 仍有大量固体鳞片存在 , 鱼皮基本完全消化完成呈液体 状。使用孔径分别为 3.0 、 0.8 、0.45 μm的过滤膜对消化完的溶液进行阶段性过滤 , 除去未消化完的固体物质。进过过滤的溶液静止一夜。然后在溶液中加入 NaCl, 使溶液浓度达到 0.1M, 使胶原蛋白析出。析出反应持续 12 小时后 , 把溶液分装入离心 ,15 ℃,3500 转离心 90 分钟 [17] 。离心后 , 除去上清液 , 用 HCl(pH 2.0) 把沉淀溶 解。盐析和沉淀溶解的步骤一共如上操作 3 次。之后把完成 3 次盐析的溶液装入透 析膜 , 把透析膜放入烧杯 , 用溶液体积 5 倍量的 15℃的去离子水透析 48 小时 , 去离子水每隔 12 小时换一次。完成透析后的溶液进行 4 天的冻结干燥。结束冻结干燥后的胶原蛋白进行 称重 , 标记日期组织名及重量后存放于