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- 2022-04-06 发布于广东
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对医药生产应用的意义 避免变性 在制备有生物活性的酶、蛋白质、激素或其他制品时,要求所需成分不变性,所以应严格控制操作条件,必要时还可以加入保护剂、抑制剂以增强蛋白质的抗变性能力。 利用变性 细菌蛋白、杂蛋白应变性除去。 第94页,共143页,编辑于2022年,星期六 核糖核酸酶的变性与复性 第95页,共143页,编辑于2022年,星期六 (3)凝固 加热使蛋白质变性并凝聚成块状称为凝固。 变性后的蛋白质由于疏水基团的暴露而易于沉淀,但沉淀的蛋白质不一定都是变性后的蛋白质。 因此,凡凝固的蛋白质一定发生变性。 第96页,共143页,编辑于2022年,星期六 二、蛋白质的分离与纯化 (一)盐析与有机溶剂沉淀: 1. 盐析: 在蛋白质溶液中加入大量中性盐,以破坏蛋白质的胶体性质,使蛋白质从溶液中沉淀析出,称为盐析。 低盐浓度可使大多数蛋白质溶解度增加,这种现象称为盐溶作用(salting in)。 第97页,共143页,编辑于2022年,星期六 常用的中性盐有:硫酸铵、氯化钠、硫酸钠等。 盐析时,溶液的pH在蛋白质的等电点处效果最好。 盐析沉淀蛋白质时,通常不会引起蛋白质的变性。 第98页,共143页,编辑于2022年,星期六 分段盐析: 半饱和硫酸铵溶液可沉淀血浆球蛋白,
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