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关于抗凋亡因子Survivin在肾性高血压心肌中的表达
文档信息
属性:
Doc-03D0TG,doc格式,正文7479字。质优实惠,欢迎下载!
说明:
作为医药学资料、临床医学资料的写作参考资料,提供解决怎么写及格式等相关问题。
适用:
作为文章写作的参考文献,解决如何写好实用应用文、正确编写文案格式、内容摘取等相关工作。
目录
TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1
正文 1
文1:关于抗凋亡因子Survivin在肾性高血压心肌中的表达 2
1 材料与方法 2
2 结果 4
3 讨论 5
文2:Survivin在肾透明细胞癌中的表达及其意义 6
1 材料与方法 7
2 结 果 8
3 讨 论 9
参考文摘引言: 10
原创性声明(模板) 11
文章致谢(模板) 12
正文
关于抗凋亡因子Survivin在肾性高血压心肌中的表达
文1:关于抗凋亡因子Survivin在肾性高血压心肌中的表达
心血管疾病是当前威胁人类健康的头号杀手,心肌肥大是心脏病的独立危险因素,其详细机制尚不完全清楚。肾性高血压是继发于肾脏病的高血压,在原有疾病损害的基础上,血压升高会加重对心脏的损害[1]。一氧化氮(nitric oxide, NO)是近年来发现的一种主要由内皮细胞等合成,释放的小分子生物活性介质,广泛参与机体多种病理生理过程。研究发现,作为体内NO合成的唯一底物Larg在多种组织或器官I/R损伤中发挥重要的保护作用[2]。深入研究LArg这一具有潜在重要前景的一氧化氮前体在治疗肺动脉高压中的作用与机制是当今该领域的重要课题。近年研究证实L精氨酸是一种新型抗高血压药物,但其作用机制尚不清楚。survivin 是新近发现的一种结构独特的哺乳类凋亡抑制蛋白( inhibition apoptosis protein , IAP ),表达于人与鼠的胚胎发育组织和人类大多数肿瘤组织, 但在正常成人组织不表达( 胸腺除外) [3],其与肿瘤发生、发展有关。survivin 还参与细胞周期调控[4]。我们应用免疫组织化学方法观察了L精氨酸对肾性高血压心肌组织中survivin的表达,并采用图像分析系统测定survivin表达的平均光密度和平均阳性面积率。探讨L精氨酸治疗由肾性高血压导致的心肌细胞的损害,为临床上采用L精氨酸治疗肾性高血压提供理论依据。
1 材料与方法
材料
实验动物 昆明种SD大鼠50只,雄性,体重180~200g ,武汉大学医学院实验动物中心提供,适应饲养1w后进行实验。
方法
动物模型建立及分组
按体重将大鼠随机分为3组:正常对照组(5只)、肾性高血压组(20只)和L精氨酸治疗组(20只)。肾性高血压组和L精氨酸治疗组大鼠用3%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(30mg/kg),然后动物取右侧卧位,暴露左肾区,在左肋弓下旁开脊柱处作一切口,入腹腔探出左肾,分离左肾动脉,上一内径为银夹,以部分缩窄左肾动脉。右侧肾脏不触及。然后,关闭创口,让大鼠苏醒。术前血压以100~140mmHg(1mmHg=)为正常范围,术后血压超过140mmHg时,即确定动物高血压形成,并用于药物实验。对那些已放置银夹,但在术后第4周末血压仍未升高的大鼠,将在给药前从药物实验中剔除。LArg组于术后第5周开始每天给予L精氨酸200mg/kg;将L精氨酸溶于蒸馏水中通过胃管灌饲给药,连续给药8周。正常对照组给予同等容积的溶剂。在给药时间结束之时,再次测量动物体重和血压。8周后将各组大鼠处死,切取心室肌组织,进行免疫组织化学实验观察。
主要试剂
① 浓缩型兔抗鼠survivin单克隆抗体(北京中杉生物技术有限公司);② 超敏即用型SP通用型免疫组织化学试剂盒(北京中杉生物技术有限公司);③ 显色试盒及多聚赖氨酸(北京中杉生物技术有限公司)
免疫组织化学SP法检测survivin相关抗原
主要步骤:① 组织切片5 μm,常规脱蜡至水,蒸馏水洗;② 3%过氧化氢,37℃孵育10 min以抑制内源性过氧化物酶活性,PBS洗4×5min;③ survivin采用微波抗原修复(3档,10 min), PBS洗4×5min;④ 正常羊血清37℃孵育10 min以减少非特异性反应;⑤ 一抗37℃孵育1h,PBS洗4×5min;⑥ 生物素标记的二抗,37℃孵育10 min,PBS洗4×5min;⑦ 链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶复合物37℃孵育10 min,PBS洗4×5min;⑧ DAB显色液显色,自来水冲洗终止反应;⑨ 苏木精复染,脱水,透明,封片。用PBS代替一抗作为阴性对照。
免疫组织化学结果判断
survivin以胞浆出现棕黄色颗粒为阳性反应。阴性对照除细胞核染成蓝色外,
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