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选修3复习提纲
一、? 基因工程
1、〔a〕基因工程的诞生
〔一〕基因工程的概念
基因工程是指根据人们的愿望,进展严格的设计,通过体外重组和转基因技术,给予生物以新的遗传特性,创建出更符合人们须要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在分子程度上进展设计和施工的,又叫做重组技术。
2、〔a〕基因工程的原理及技术
原理:基因重组
技术:〔一〕基因工程的根本工具
1.“分子手术刀〞——限制性核酸内切酶〔限制酶〕
〔1〕来源:主要是从原核生物中别离纯化出来的。
〔2〕功能:可以识别双链分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。
〔3〕结果:经限制酶切割产生的片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。
2.“分子缝合针〞——连接酶
(1)两种连接酶〔E·连接酶和T4连接酶〕的比较:
①一样点:都缝合磷酸二酯键。
②区分:E·连接酶来源于T4噬菌体,只能将双链片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。
(2)及聚合酶作用的异同:聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。连接酶是连接两个片段的末端,形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车〞——载体
〔1〕载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点,供外源片段插入。③具有标记基因,供重组的鉴定和选择。
〔2〕最常用的载体是质粒,它是一种袒露的、构造简洁的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制实力的双链环状分子。
〔3〕其它载体: 噬菌体的衍生物、动植物病毒
(二)基因工程的根本操作程序
第一步:目的基因的获得
1.目的基因是指: 编码蛋白质的构造基因 。
干脆别离获得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。
3技术扩增目的基因
〔1〕原理:双链复制
〔2〕过程:第一步:加热至90~95℃解链;第二步:冷却到55~60℃,引物结合到互补链;第三步:加热至70~75℃,热稳定聚合酶从引物起始互补链的合成。
第二步:基因表达载体的构建
1.目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因可以表达和发挥作用。
2.组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因
〔1〕启动子:是一段有特别构造的片段,位于基因的首端,是聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出,最终获得所需的蛋白质。
〔2〕终止子:也是一段有特别构造的片段 ,位于基因的尾端。
〔3〕标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞挑选出来。常用的标记基因是抗生素基因。
第三步:将目的基因导入受体细胞_
1.转化的概念:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
2.常用的转化方法:
将目的基因导入植物细胞:采纳最多的方法是 农杆菌转化法,其次还有 基因枪法和 花粉管通道法等。
将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是 显微注射技术。此方法的受体细胞多是 受精卵。
将目的基因导入微生物细胞:
3.重组细胞导入受体细胞后,挑选含有基因表达载体受体细胞的根据是标记基因是否表达。
第四步:目的基因的检测和表达
转基因生物的染色体上是否插入了目的基因,方法是采纳 分子杂交技术。
目的基因是否转录出了,方法是采纳 用标记的目的基因作探针及杂交。
目的基因是否翻译成蛋白质,方法是从转基因生物中提取 蛋白质,用相应的 抗体进展 抗原-抗体杂交。
个体生物学程度的鉴定。如 转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。
〔三〕〔b〕基因工程的应用
1.植物基因工程:抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的品质。
2.动物基因工程:进步动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物消费药物。
3.基因治疗:把正常的外源基因导入病人体内,使该基因表达产物发挥作用。
〔四〕〔a〕蛋白质工程的概念
蛋白质工程是指以蛋白质分子的构造规律及其生物功能的关系作为根底,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进展改造,或制造一种新的蛋白质,以满意人类的消费和生活的需求。〔基因工程在原那么上只能消费自然界已存在的蛋白质〕〔1〕蛋白质工程崛起的缘由:基因工程只能消费自然界已存在的蛋白质
〔2〕蛋白质工程的根本原理:它可以根据人的需求来设计蛋白质的构造,又称为第二代的基因工程。
根本途径:从预期的蛋白质功能动身,设计预期的蛋白质构造,推想应有的氨基酸序列,找到相对应的脱氧核苷酸序列〔基因〕以上是蛋白质工程特有的途径;以下根据基因工程的一般步骤进展。〔留意:目的基因只能用人工合成的方法〕
设计中的困难:如何推想非编码区以及内含子的脱氧核苷
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