《发育生物学》第3版课件004-翻译水平调控.pptVIP

* 蛋白质合成初始产物的后加工 肽链中氨基酸残基的化学修饰 肽链N端甲硫氨酸或甲酰甲硫氨酸的去除 信号肽的切除 肽链的折叠 切除前体中功能不必需的肽段 二硫键的形成 多肽链Ｎ端和Ｃ端的修饰 * * 翻译后的调控 * 翻译的调控 mRNA的寿命 AUG前后的保守序列（CCCA/GCCAUGG) 激素对特定mRNA稳定性的影响 翻译因子磷酸化调控 酵母GCN4mRNA翻译的调控 转铁蛋白mRNA翻译的调控 早期发育中母体效应因子的影响 * mRNA寿命不同对蛋白质合成的调控 主要机制：mRNA的选择性降解和稳定性不同调控蛋白质的合成。mRNA的寿命由3’UTR的序列(富含AU)决定。 举例: β –珠蛋白基因 c - fos基因 * 激素对特定mRNA稳定性的影响 催乳素－－－酪蛋白 PRL延长酪蛋白mRNA的寿命，较一般mRNA长25倍，使酪蛋白mRNA进行更多次翻译。其作用是通过稳定酪蛋白mRNA来实现的。 * 翻译因子磷酸化调控 eIF-4F因子的磷酸化对蛋白质合成的激活作用 其它因子磷酸化对翻译的激活作用 eIF-2的磷酸化对翻译的抑制作用 * 转铁蛋白mRNA翻译的调控 转铁蛋白（ferritin)和红细胞的５－氨基乙酰丙酸合成酶两种mRNA的翻译调控与铁离子密切相关 * * 早期发育中母体效应因子的影响 早期发育母体效应因子调控的证据 　　　胚胎早期的发育主要由卵母细胞中的母体效应因子所控制。 贮藏性mRNA的发现，大约有20000-50000种不同种类的mRNA，每种大约1600个拷贝。 卵母细胞贮藏性mRNA性质和位置 在卵子发生中合成的大量mRNA储藏在卵胞质中供早期胚胎发育阶段利用。 * 翻译和翻译后调控的机制 卵母细胞翻译后调控机制的假说 关于早期发育的几点启示 胚胎基因组的激活 血红蛋白翻译水平的控制 翻译水平调控的广泛性 RNA编辑 翻译后的调控 自学内容 * * 思考题 翻译的基本过程 参与蛋白质生物合成的主要物质 胚胎早期发育中母体“效应因子”的影响 激素对特定mRNA稳定性的影响范例 卵母细胞翻译后调控机制的假说 转铁蛋白mRNA翻译的调控机制（经典的翻译调控例子） * 研究举例： STAT1是否存在翻译水平的调控？ * 第一部分 * Microarray * Yeast translation state array * Human cancer cDNA array * * 1) vimentin, 2) stat1, 3) highly basic protein 1 2 3 * Resting cells Activated cells 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 Vimentin Highly basic protein Actin 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1011 80 S 80 S 80 S * Stat1 A (2400,2200 bp) B Stat1 Control INF-α 图1 Northern blot 检测Stat1 mRNA结果 A. 对数生长细胞；B. G0期细胞 * A B Stat1 Stat1 (p91,p84) Control INF-α 图2 免疫沉淀法检测Stat1 蛋白质表达结果 A. 对数生长细胞；B. G0期细胞 * 图3 Stat1 mRNA和蛋白质表达差异比较 A.为对数生长细胞， B.为G0期细胞 Fig. 3 The difference of both Stat1 mRNA and protein expression. A.log-growth hFF cells; B. G0(starved) hFF cells * 图4 Stat1 蛋白质合成效率比较 Fig. 4 The Stat