15.3 高效液相色谱-质谱联用技术.docxVIP

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一、实现 LC-MS 的困难: 1. LC 流动相对MS工作条件的影响 1ml溶剂气化生成 500 ~1300mL的蒸气。而质谱仪只能接受10 mL/min气体流量,有时流动相中含难以挥发的缓冲盐 2、质谱离子源温度、电离方式不适宜液相色谱所分析的样品。 电喷雾电离(ESI,接口+软电离技术)流出液在高电场下形成带电喷雾,在电场力作用下穿过气帘 气帘的作用:雾化;蒸发溶剂;阻止中性溶剂分子。 特点:是LC- MS的基本配置接口是一种软电离方式,适合稳定性差、极性大、分子量大的物质的电离。主要生成准分子离子([M+H]+ 、[M-H]-、 [M+Na]+等,生物大分析产生多电荷离子。 灵敏度高 不能进行谱库检索 不适用于非极性化合物的分析 对于大分子化合物,电喷雾产生多电荷离子,相对分子质量计算方法如下: 选相邻峰,电荷n, n +1 m1=(Mr + n+1)/ (n+1) m2=(Mr + n)/n .大气压化学电离 (Atmospheric Pressure Chemical Ionization, APCI) 特点:化学电离,软电离技术,产生的碎片很少 适用于弱极性、分子量小(2000Da)和热稳定化合物分析 灵敏度高 ESI的补充技术 质量分析器: 1. 四极杆质量分析器,对于给定的直流DC和射频电压RF ,特定质荷比的离子在轴向稳定运动,其他质荷比的离子则与电极碰撞湮灭。将DC和RF以固定的斜率变化,实现质谱扫描功能。 2. 离子阱质量分析器,特定m/z离子在阱内一定轨道上稳定旋转,改变端电极电压,不同m/z离子飞出阱到达检测器。 3.飞行时间质量分析器,具有相同动能、不同质量的离子,其飞行速度不同而分离。如果固定离子飞行距离,则不同质量离子的飞行时间不同,质量小的离子飞行时间短而首先到达检测器。 液质联用的应用: 医药、临床:药物代谢、药物动力学、杂质分析、天然产物分析、疾病诊断 生物化学:肽、蛋白质、寡核苷酸、糖 环境化学:农药和农残分析、有机污染物、土壤/食品/水分析 食品科学:香料、添加物、包装物、蛋白质、致癌物 化学:有机合成物

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