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家蚕受昆虫病原线虫EPN安全性影响讨论 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：家蚕受昆虫病原线虫EPN安全性影响讨论 1 1、材料与方法 2 1)虫体喷雾直接侵染试验 2 2)桑叶喷雾间接侵染试验 3 2、结果与分析 4 3、小结与讨论 5 文2：人体健康受海洋污染影响讨论 5 1、海洋污染物定义 6 2、海洋污染物分类 6 3、污染物在海洋中的迁移转化 8 4、海洋污染对人体健康的影响 9 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 11 正文 家蚕受昆虫病原线虫EPN安全性影响讨论 文1：家蚕受昆虫病原线虫EPN安全性影响讨论 昆虫病原线虫(entomopathogenic nematode，EPN)是昆虫的专化寄生性天敌，具有分布范围广、寄主种类多、能主动寻找寄主、对人畜及环境安全等优点，并能够人工大量培养繁殖，在欧美、澳大利亚、韩国、日本等地区得到广泛应用[1，2，3]。EPN主要通过寄生土壤中幼虫和蛹而达到防控害虫的效果[4]。线虫通常以感染期幼虫经害虫身体的自然孔口或节间膜侵入寄主体内，释放携带的共生细菌[5]，后者在昆虫血淋巴内增殖，杀死寄主昆虫。感染期幼虫是昆虫病原线虫生活史中唯一能自由存活的龄期，可使用普通的喷雾器进行喷施[6]。近年来，EPN制剂已成功用于防治地老虎、蛴螬、黄条跳甲等多种地下害虫[7，8，9]。随着EPN的推广应用，王宇坤等[10]研究了其对蚜茧蜂寄生的影响，除此以外，鲜见EPN对非靶有益生物的影响研究。 利用室内生物活性测定和田间试验比较了EPN对家蚕的急性毒性及其生产力的影响，评价其对家蚕的安全性，以期为科学使用EPN防治害虫及综合评估EPN对有益生物的影响提供数据。 1、材料与方法 试验材料与设备 EPN制剂：绿保安昆虫病原线虫1亿尾/袋(小卷蛾斯氏线虫Steinernemacarpocapsae All，浙江绿神天敌生物技术有限公司)，使用时将海绵制剂浸泡在适量水中用力挤压，洗2～3次(海绵发白为止)成为母液，母液对水50 L均匀粗喷洒于桑叶表面。供试家蚕品种：秋丰×白玉，家蚕龄期2龄(4 d)；供试桑品种：农桑12号。Poter喷雾塔：英国Burkard。 试验设计 EPN对家蚕的侵染试验 1)虫体喷雾直接侵染试验 将EPN制剂用无菌水分别稀释至约2000、1000、500尾/mL 3个密度的线虫悬浊液，供试。取孵化期一致的2龄期家蚕幼虫，至培养皿中，每皿20头幼虫，参照鳞翅目幼虫喷雾法[11]，用Poter喷雾塔喷雾处理。每个密度重复3次，并设空白对照。处理后，将试虫移至干净的桑叶上，置于25℃人工气候箱中，光周期设定为14 h/10 h(光/暗)，相对湿度85%。分别于处理后24、48、72 h检测试虫的状态，统计死亡数，并对死亡的幼虫进行解剖，统计体内的线虫数量[12]。72 h时终止试验，并对不同处理的试虫进行解剖，观察线虫对试虫的侵染，并统计线虫数。 2)桑叶喷雾间接侵染试验 按本节1)所述准备线虫悬浊液和家蚕幼虫，并将新鲜桑叶打成5 cm直径的圆片。用Poter喷雾塔喷雾将线虫分别喷到准备好的桑叶上，每处理3次重复，喷雾后，阴凉处避光晾30 min(桑叶上没有滞水)，将事先准备好的家蚕幼虫移到桑叶上，每个重复20头幼虫，然后移入人工气候箱中培养，随后处理同1)所述。 EPN对家蚕安全性试验 在田间用15亿尾/hm2EPN制剂悬浮液喷施桑树叶片，对水750 L/hm2喷雾，采用工农16 L型手动背负式农用喷雾器。EPN制剂喷施桑叶后，间隔0、6、24、48 h采收桑叶同时采收空白对照组的桑叶，分别饲喂家蚕，每个重复(EPN和空白)用蚕60头，每处理重复3次，每次饲喂均查看家蚕生命力相关的状况。48 h后，所有处理组均恢复饲喂正常的桑叶，按常规技术进行管理，直至家蚕吐丝结茧。 家蚕安全性试验观测指标：定时调查家蚕的死亡率(存活率)、化蛹率(结茧率)等指标，化蛹10 d后称量全茧量和茧层量，计算茧层率[13]，并采用DPS数据处理系统对防效数据进行Duncan′s新复极差法(DMRT)进行差异显著性分析，综合分析虫蛹生命力和茧质成绩等指标。 2、结果与分析 EPN对家蚕侵染试验 直接喷施，线虫可侵染家蚕幼虫(见表1)，试验结果显示侵染率和线虫密度没有线性关系，3个处理间的线虫侵染率在67%～75%之间，没有显著性差异(P)，72 h后死亡率和处理密度也没有表现出线性关系。但幼虫体内的平均线虫数，3个处理间有显著差异，随着处理密度的增加，幼虫体内的线虫数显著增加。 喷洒桑叶的试验结果显示：线虫并不能侵染家蚕幼虫，试验期间各处理组的