微生物纯培养的分离方法.pptVIP

第1页，共27页，编辑于2022年，星期日 微生物纯种分离 将多种混杂微生物，经某种技术或方法分离成纯种的过程 纯培养（pure culture） 将在实验室条件下从一个细胞或一种细胞群繁殖得到的后代称为纯培养。 第2页，共27页，编辑于2022年，星期日 微生物样品 多种混杂 某种方法 分散成单个微生物 平板 培养 单菌落 每个菌落为纯种（纯培养） 单菌落转接培养 纯种（纯培养） 微生物纯种分离的原理和方法 第3页，共27页，编辑于2022年，星期日 单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，称为菌落。 菌落 第4页，共27页，编辑于2022年，星期日 一个菌落是一个纯种，也是一个纯培养； 单个微生物只在固体培养基上形成菌落； 在液体培养基中不会形成菌落 第5页，共27页，编辑于2022年，星期日 同一细菌在不同的培养平板上形成不同的特征菌落 第6页，共27页，编辑于2022年，星期日 分区划线法（蛇形线法）操作图 第一区划线 第二区划线 第三区划线 一、划线法 第7页，共27页，编辑于2022年，星期日 分区划线法适用范围： 适用于浓度较大的样品 第8页，共27页，编辑于2022年，星期日 连续划线法操作图 连续划线法适用范围： 适用于浓度较小的样品 第9页，共27页，编辑于2022年，星期日 二、稀释平板法 从土壤中分离纯微生物 104/ml 103/ml 102/ml 101/ml 第10页，共27页，编辑于2022年，星期日 1、稀释倾注分离法 第11页，共27页，编辑于2022年，星期日 涂布平板法 稀释倒平板法 2、稀释涂布分离法 第12页，共27页，编辑于2022年，星期日 采用显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞或单个个体进行培养以得到纯培养，称为单细胞（单孢子）分离法。 第13页，共27页，编辑于2022年，星期日 个体较小的微生物需采用显微操作仪 分离难度与细胞或个体的大小成反比 营养琼脂平板上不能形成菌落 较大的微生物可使用毛细管提取 三、单细胞挑取法 五、小滴分离法 第14页，共27页，编辑于2022年，星期日 Each colony was examined microscopically 第15页，共27页，编辑于2022年，星期日 四、选择培养基分离法 创造适于目的微生物生长条件 原理 促使目的微生物快速生长呈优势菌 抑制非目的微生物生长 从混杂微生物中分离目的微生物 第16页，共27页，编辑于2022年，星期日 1、利用选择培养基进行直接分离 选择培养基 只允许特定微生物生长，而同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基 第17页，共27页，编辑于2022年，星期日 土壤 目的菌优势 非目的菌 选择培养基 直接分离 单细胞 选择培养基平板 （含牛奶或酪蛋 白唯一C、N源） 37℃ 培养 目的菌落 菌落周围有透明蛋白水解圈 1、利用选择培养基进行直接分离 例一：分离筛选蛋白酶产生细菌 第18页，共27页，编辑于2022年，星期日 含牛奶选择培养基目的菌生长平板 营养选择因子：牛奶或酪蛋白 只允许分解利用蛋白质的目的菌生长，淘汰非目的菌 长出的目的菌并不一定是同种细菌，但皆产蛋白酶 例一：分离筛选蛋白酶产生细菌 第19页，共27页，编辑于2022年，星期日