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微生物学检验 金黄色葡萄球菌菌检验 中华人民共和国国家标准 GB/T 4789.4-2003 25g样品+ 225ml 生理盐水 5mL样品匀液(1:10)+ 50mL胰酪胨大豆肉汤 血平板 36± 1℃ 24hr 镜 检 血浆凝固酶实验 报告结果 36± 1℃ 24hr 36± 1℃ 24hr 36± 1℃ 6hr BP平板 定性检测 第三十页,共五十四页。 微生物学检验 金黄色葡萄球菌菌检验 中华人民共和国国家标准 GB/T 4789.4-2003 定量检测 (平板法) 25g样品+ 225ml 生理盐水 选三个连续梯度,每个梯度分别取1mL接种之至表面干燥的BP平板(如0.4mL,0.3mL,0.3mL) 平板计数(分别记录每种类型的菌落数) 36± 1℃ 48hr 镜 检 营养肉汤 血浆凝固酶实验 报告结果 金葡菌数/g(mL) 每种类型至少选取一个菌落 36± 1℃ 24hr 36± 1℃ 6hr 梯度稀释 适用于检测金黄色 葡萄球菌数不小于 10/g(mL)的食品 第三十一页,共五十四页。 B-P平板 第三十二页,共五十四页。 控制措施 防止带菌人群对各种食物的污染:定期对生产加工人员进行健康检查,患局部化脓性感染(如疥疮、手指化脓等)、上呼吸道感染(如鼻窦炎、化脓性肺炎、口腔疾病等)的人员要暂时停止其工作或调换岗位。 对肉制品加工厂,患局部化脓感染的禽、畜尸体应除去病变部位,经高温或其他适当方式处理后进行加工生产。 第三十三页,共五十四页。 防止带菌人群对各种食物的污染:定期对生产加工人员进行健康检查,患局部化脓性感染(如疥疮、手指化脓等)、上呼吸道感染(如鼻窦炎、化脓性肺炎、口腔疾病等)的人员要暂时停止其工作或调换岗位。 防止金黄色葡萄球菌对奶及其制品的污染:如牛奶厂要定期检查奶牛的乳房,不能挤用患化脓性乳腺炎的牛奶;奶挤出后,要迅速冷至-10℃以下,以防毒素生成、细菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶为原料,注意低温保存。 第三十四页,共五十四页。 大肠杆菌O157︰H7 第三十五页,共五十四页。 EHEC O157︰H7生物学特性 EHEC O157:H7属于肠杆菌科埃希氏菌属。革兰氏染色阴性,无芽胞,有鞭毛,动力试验呈阳性。其鞭毛抗原可丢失,动力试验阴性。。 EHEC O157:H7具有较强的耐酸性,pH2.5-3.0,37℃可耐受5小时; 耐低温,能在冰箱内长期生存;在自然界的水中可存活数周至数月; 不耐热,75℃ 1分钟即被灭活;对氯敏感,被1mg/L的余氯浓度杀灭。 EHEC 的最适生长温度为33-42℃,37℃繁殖迅速,44-45℃生长不良,45.5℃停止生长。 不能分解4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷(MUG)产生荧光,即MUG阴性。 第三十六页,共五十四页。 进出口肉及肉中肠出血性大肠杆菌O157︰H7检验方法 检验检疫行业标准 SN/T 0973-2000 25g样品+ 225ml EC肉汤 接种SMAC 37℃ 24h 生化反应鉴定 血清凝集鉴定 报告结果 或 41℃ 24h 接种MUG\LIST发酵管培养基 37℃ 24h EHEC 乳胶凝集试验 第三十七页,共五十四页。 EHEC O157 ︰H7在显色培养基上 第三十八页,共五十四页。 有很强的耐酸和耐低温能力,可以产生大量的Vero毒素。1982年美国首次报道了由大肠杆菌O157:H7引起的出血性肠炎暴发。日本在1996年和2001年发生的大肠杆菌 O157:H7的暴发流行,引起出血性腹泻,感染人数较多,并造成12人死亡,引起了全世界的关注。此外,美国、加拿大、瑞典、澳大利亚、英国的苏格兰和威尔士等国家和地区也相继报道了大肠杆菌O157:H7的散发性感染和暴发流行。日本、加拿大及瑞士等国已将大肠杆菌O157:H7列为必须报告的传染病,予以高度重视。我国于1988年首次分离到大肠杆菌O157:H7,从已有的流行病调查资料来看,我国亦存在大肠杆菌O157:H7的散发病例,但尚未有暴发流行的报道。 O157︰H7的危害 第三十九页,共五十四页。 我国动物产品中O157︰H7的污染状况 对市售生鲜猪肉和禽肉检测发现: 猪肉中均未发现O157︰H7; 有少部分禽肉污染O157︰H7。 第四十页,共五十四页。 * * 动物产品中微生物检测技术 王 娟 中国动物卫生与流行病学中心 2009-3-11 第一页,共五十四页。 内容 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌 O157︰H7 单核增生性李斯特氏菌 存在问题 第二页,共五十四页。 沙门氏菌 第三页,共五十四页。 DANIEL ELMER SALMON, (1850-1914)美国兽医微生物和病理学家。是美国授予
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