外周血microRNA24YKL40与与肺功能和治疗结局的相关性（呼吸系统疾病资料）.docVIP

外周血microRNA24YKL40与与肺功能和治疗结局的相关性（呼吸系统疾病资料） 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：外周血microRNA24YKL40与与肺功能和治疗结局的相关性 1 -40 3 文2：新生儿结膜炎常见病原菌和治疗的探讨 8 1 资料和方法 9 2 结果 10 3 讨论 10 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 13 正文 外周血microRNA24YKL40与与肺功能和治疗结局的相关性（呼吸系统疾病资料） 文1：外周血microRNA24YKL40与与肺功能和治疗结局的相关性 感染性肺炎是儿科常见疾病，50%患儿直接感染病毒或继发于支原体、细菌感染引起的病毒[1]。鉴于病毒性肺炎具有季节性的特点，例如流感病毒、新型冠状病毒、呼吸道合胞病毒等都可能引发大范围爆发和流行，严重危及儿童的生命健康。因此在治疗过程中，寻找有效的生物标志物用于评估病情进展、临床疗效和预后判断具有重要的临床意义。YKL-40属于一类典型的分泌型糖蛋白，与炎症反应密切相关，而且在肺部疾病的发生、发展过程中也发挥重要作用[2]。李智琼等学者[3]证实，YKL-40在支原体肺炎患儿血清中含量升高，并且可用于辅助诊断和评价病情严重程度及预后。KORTHAGEN等[4]也发现，肺泡灌洗液中YKL-40含量与肺纤维化患者预后呈负相关。但是其在病毒性肺炎患儿血清中的含量及临床意义未见学者关注。另外考虑到血清中很多蛋白分子的表达具有不稳定性，易被蛋白酶所降解，因此从上游水平寻找相关的microRNA(miRNA)作为检测指标。笔者通过在线生物学软件筛查发现，YKL-40编码基因CHI3L1是miR-24的下游靶基因[5]，而且众多研究也证实，miR-24在炎症疾病中也属于功能性基因[6]。因此本实验拟研究浙江大学医学院附属儿童医院病毒性肺炎患儿血清miR-24、YKL-40与疾病严重程度、肺功能及预后的相关性，以期为指导临床诊断和个体化治疗提供理论依据，现报道如下。 1、资料与方法 一般资料 选取2018年9月—2019年4月在浙江大学医学院附属儿童医院住院的117例病毒性肺炎患儿作为实验组。其中，男性74例，女性43例;年龄2～11岁，平均(±)岁;流感病毒37例，呼吸道合胞病毒31例，副流感病毒19例，腺病毒12例，巨细胞病毒11例，EB病毒7例。纳入标准:①参考《儿童社区获得性肺炎管理指南(2013修订)》[7]关于病毒性肺炎和重症肺炎的诊断标准;②经血清分子生物学及直接免疫荧光法检测病毒特异性中和抗体;③所有重症肺炎患儿需经2位儿内科副主任及以上医师确诊;④由患儿法定监护人签署知情同意书。排除标准:①合并支气管哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺栓塞;②急慢性炎症反应;③严重肝肾功能障碍;④免疫系统疾病;⑤先天性疾病;⑥反复呼吸道感染。根据不同预后分为痊愈组、好转租及迁延难愈组。另外选取同期本院健康体检儿童30例作为对照组。纳入标准:①年龄与纳入的病毒性肺炎患儿相匹配;②无基础性疾病;③近3个月内无呼吸道感染病史;④各项血常规指标和血生物化学指标均正常。本研究通过医院伦理委员会批准。 主要仪器及试剂 Master Screen Paed型肺功能仪(德国耶格公司)，One StepPrime Scriptc DNAS ynthesis Kit逆转录试剂盒和SYbr Premix Ex TaqTMⅡ试剂盒(日本TaKaRa公司)，YKL-40ELISA试剂盒(美国RD公司)，利巴韦林注射液(马鞍山丰原制药有限公司，生产批号:)，阿奇霉素注射液(苏州长征-欣凯制药有限公司，生产批号: 治疗方法 所有患儿临床会诊后静脉滴注利巴韦林注射液10mg/kg，1次/d;合并细菌感染者静脉滴注阿奇霉素注射液(溶于250ml生理盐水)10mg/kg，1次/d，7d为1个疗程。另外给予退热、镇咳、祛痰等对症治疗，1～2个疗程后，采集晨起空腹血液标本。 检测指标 -40 所有患儿入院就诊时第一时间采集肘静脉血6ml，静置20min，3000min离心20min，离心半径10cm，取上清，采用YKL-40ELISA试剂盒检测血清YKL-40含量。 -24mRNA ，留取部分血清标本，加入Trizol试剂，提取血清总RNA，采用Thermo FishermiRNA Fit-Strandc DNA Synthesis SuperMix试剂盒进行逆转录反应生成cDNA。采用SYbrGreen法行实时荧光定量聚合酶链反应，冰浴中配制10μlPCR反应体系:正反向引物各μl、2×SYbrGreenIMsater5μl、cDNA模板1μl、适量去离子水。PC