脓毒血症患者生化检测设计方案.pdfVIP

脓毒血症患者生化检测设计方案 病例 谢某，男，64岁，因全身皮肤出现黄染，伴有消瘦，饮食差， 双下肢活动受限，二便失禁，寒战高热。曾有双瓶血培养瓶呈阳性， 革兰阴性阳性细菌均存在，降钙素原检测为21.39ng/ml,以及各项生 化指标异常，确诊为 “重症感染，血行感染，肿瘤晚期”遂入我院。 拟诊为 “脓毒血症”。临床医生根据需要，开出申请检验单，要求降 钙素原的检测。 一、脓毒血症概述 脓毒血症是由感染因素引起的全身炎症反应综合征。表现为致病 菌或病毒产生的毒素持续释放进入血液，导致机体中毒的一种情况。 临床表现为寒战、高热、心率加快、呼吸困难、精神状态改变等症状。 降钙素原的检测在细菌感染特别是脓毒血症的方面明显优于传统诊 断指标。可通过降钙素原的检测指标变化率为临床提供一个可靠的预 后判断标准。 二、降钙素原检测方法 酶联免疫法 三、检测原理 是结合一步免疫测定夹心法以及ELFA法，用来检测血清中有无 降钙素原的检测方法。当细菌侵入人的体内就会产生一种细菌感染， 人体内多种细胞将会因此分泌出大量的降钙素原。如果人体发生很严 重的细菌、真菌或者寄生虫感染的时候，降钙素原检测的水平结果就 会偏高；如果只是轻微或者局部的感染时，降钙素原不会升高；如果 患者存在病毒感染或者自身性免疫性疾病的时候，降钙素原的水平可 能会有轻度的升高。因此，在临床上常用降钙素原检测的结果有无升 高来判断人体是否有感染。 四、方案设计 1. 患者的所采集的标本 （1）标本所需的类型应为患者的血清或者血浆。 （2）收集患者血液的是绿色管。 （3）患者抽血前应保持空腹，安静，休息的状态。 抽血前24小时内不宜饮酒，要避免做各种剧烈的运动。采用静 脉采血，除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位 （因为体位能直接 影响水分在血管内外的分布，从而将会影响降钙素原检测的浓度）， 从肘部静脉取血，使用止血带的时间不可以超过一分钟，穿刺成功之 后立即松开止血带。 （4 ）接收到的患者刚采集的标本，不能立刻离心，需放置等上 清液稀出，在1 小时之内放入离心机内配平，4000rpm 离心15 分钟， 以此来分离血清。离心出的血清应为淡黄色，如果有血丝或者凝块浮 在上面，必须将血丝和凝块去除。 （5）对于标本破裂、标本量不足、严重溶血、严重脂血、严重浑 浊的标本、以及受到细菌污染的标本，必须拒收，然后通知患者重新 去采集。 2．标本的处理 每天工作结束之后，将检验完成的血标本密封放置冰冻室，按时 间顺序放置指定的分类位置冷藏。在2～8℃下可保存48小时，浓度 不会有显着的变化，在-25±6℃下冷冻6个月，如果需要复查，即可 拿出，不会影响到患者的测定结果。 3.检验仪器和试剂盒 VIDAS全自动荧光免疫分析仪，PCT试剂盒 4.检验步骤 （1）从冰箱中取出PCT试剂盒，将试剂恢复至室温 （室温放置 30分钟）。开启试剂盒，检查SPR袋是否正确密封并且确保其未受损 害，否则将不能再使用袋中的SPR管。每份待测标本都分别使用一条 试剂条和一个SPR管，确保取出需要后的SPR之后要重新仔细的去密 封储物袋，以此来保持SPR的稳定性。然后再把试剂盒放入2～8℃ 下储存 （不可冷冻）。 （2）在试剂条上编写与待测标本血清相同的编号，以来防止加 错标本。在每个CPR试剂条的第一孔，用加样枪和吸嘴加入对应的待 测样品血清200ul。 （3）将加好血清的PCT试剂条和相应的SPR插入仪器检测仓中， 关好仪器仓盖。 （4）在仪器电脑主机上进行命令编辑：在电脑上找到vidasPC 的菜单点击进入，然后点击编辑菜单 ，进入编辑页面，加载以及编 辑菜单，编辑样品ID及项目，输入与试剂条和SPR管对应位置对应 的编号以及需要检测的项目（PCT），点击创建或者按键盘的F10，编 辑内容将会停留在预留与，点击仓位预留 （将会变成红色），进入 VIDASI，再选择与试剂条相应的仓位。需再仔细检查放置的试剂条和 CPR管是否与创建的项目以及仓位对应，最后点击开始。 （5）全自动荧光免疫分析在半小时内检测结束之后，取出试剂 条和SPR。并检查试剂条第一孔中的血清是否完全被仪器所吸收，若 无问题再将其丢进对应的垃圾桶中等待处理。 5.注意事项 检测完毕后，如若所测得的降钙素原浓度＞200ng/ml的时候， 必须将标本血清稀释10倍