《食品微生物学检验》课件 4-2 大肠菌群计数.pptVIP

复习 与思考题 1、翻译：大肠菌群测定 (Enumeration of coliforms ) 、 MPN 含义和用途？ 2、大肠菌群的定义？为什么选择大肠菌群作为食品可能被粪便（肠道病原菌）污染的指示菌？ 3、概述本国标中检查大肠菌群的主要培养基有哪三种？各种中主要的选择性鉴别成份及其机理是什么？ 4、试述大肠菌群测定程序的第一法。 5、报告中食品样品大肠菌群数的计算。 6、自学： ⑴ 附录B：大肠菌群最可能数（MPN）检索表（实验用） ⑵ 生活饮用水大肠菌群检测（实践用） * * 食品微生物学检验大肠菌群计数 GB 4789.3-2016 * 食品安全国家标准食品微生物学检验 大肠菌群计数National food safety standardFood microbiological examination Enumeration of coliforms 2016-12-23发布 2010-06-23 实施 中华人民共和国卫生部 发布 * 前 言 本标准代替 GB4789. 3—2010《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》、 GB/T4789. 32—2002《食品卫生微生物学检验 大肠菌群的快速检测》和SN/T0169—2010《进出口 食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法》大肠菌群计数部分。 本标准与GB4789. 3—2010相比,主要变化如下: ——增加了检验原理; ——修改了适用范围; ——修改了典型菌落的形态描述; ——修改了第二法平板菌落数的选择; ——修改了第二法证实试验; ——修改了第二法平板计数的报告 * 1 范围 本标准规定了食品中大肠菌群（Coliforms）计数的方法。 本标准第一法适用于大肠菌群含量较低的食品中大肠菌群的计数;第二法适用于大肠菌群含量较高的食品中大肠菌群的计数。 /uploads/201005/12751421897T9lSsmf.jpg * 2 术语和定义 2.1 大肠菌群（coliforms）:在一定培养条件下（基质、在36±1℃ 48h－96h）能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞（中小）杆菌。 （一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。） （加） *用途：该菌主要来源于人和温血动物粪便，以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量；推断食品中有否污染肠道 致病菌（如霍乱、伤寒、痢疾等）的可能。 * 为何选用大肠菌群作为食物和饮水被粪便污染的指标－指示菌？ －－因其符合作为指示菌的条件： ①来源只有肠道，且普遍而量多： ②在外界生存条件和肠道致病菌相符或略长，但不在水中繁殖; ③对消毒药的抵抗力和肠道致病菌相符; ④检查方法比较简单。 * 还有什么菌可作为食物和饮水被粪便污染的指标菌？ －－产气荚膜杆菌和粪链球菌可辅助证明，二者都是重要肠道正常菌群成员 产气荚膜杆菌：可在外界环境中形成芽胞，抵抗力强，存活时 间长，对氯抵抗力强；检测有氯消毒水的污染 情况。 粪链球菌：在自然环境中存活时间又较短。 大肠菌群、产气荚膜杆菌和粪链球菌三者都检出说明食品新近被粪便所污染。 * 2.2 最可能数most probable number，MPN: 最可能数 most probable number，MPN:基于泊松分布的一种间接计数方法。 （加）泊松分布(Poisson distribution):（述昆虫随机分布型的数学表达公式。）一种概率分布，其特点是该分布的均值等于方差。适合于描述单位时间内随机事件发生的次数。 Siméon-Denis Poisson *在生态学中常用来描述随机分布型的生物个体的空间分布格局。泊松分布是一种统计 与概率学里常见到的离散，由法国数学家西莫恩·德尼·泊松（Siméon-Denis Poisson）在1838年发表。 * 3 检验原理 3. 1 MPN法 MPN法是统计学和微生物学结合的一种定量检测法。待测样品经系列稀释并培养后,根据其未 生长的最低稀释度与生长的最高稀释度,应用统计学概率论推算出待测样品中大肠菌群的最大可能数。 3. 2 平板计数法 大肠菌群在固体培养基中（结晶紫中性红胆盐琼脂）发酵乳糖产酸,在指示剂的作用下形成可计数的红色或紫色,带有或不带 有沉淀环的菌落。 * 4 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材