《食品微生物学检验》课件 3章1节 沙门氏菌检验.pptVIP

反应序号A3：补做ONPG。ONPG阴性为沙门氏菌，同时赖氨酸脱羧酶阳性，甲型副伤寒沙门氏菌为赖氨酸脱羧酶阴性。 硫化氢（－） 靛基质（－） 尿素 （－） 氰化钾（－） 赖氨酸（＋） 补充 ONPG（邻硝基酚β－D半乳糖苷） （－）无色 （＋）阳性，黄色：埃希氏菌 结果3： 沙门氏菌 * 2.5 糖发酵管：见第A.12章。 （靛基质阳性时补做甘露醇和山梨醇，） 2.6 邻硝基酚β-D-半乳糖苷（ONPG培养基）：见第A.13章。 反应H2S阴性，靛基质阳性时补做 ONPG， 结果： － ： salmonella （不变色），极少阳性 ＋： E.coli（黄色） 有半乳糖苷酶产生变为黄色，无此酶24h不变色。 * 蛋白胨 10.0g 牛肉膏 5.0g 葡萄糖 5.0g 硫酸亚铁 0.3g 磷酸氢二钠 4.0g 煌绿 0.025g 柠檬酸铋铵 2.0g 亚硫酸钠 6.0g 琼脂 18.0g 蒸馏水 1000.0g BS琼脂 酵母膏 3.0g L-赖氨酸 5.0g 木糖 3.75g 乳糖 7.5g 蔗糖 7.5g 去氧胆酸钠 2.5g 柠檬酸铋铵 0.8g 硫代硫酸钠 6.8g 氯化钠 5.0g 酚红 0.08g 琼脂 15.0g 蒸馏水 1000.0g XLD琼脂 * * * * * * * 2. 本标准也保留了可以同时直接接种 蛋白胨水 (供做靛基质试验)、 尿素琼脂 (pH7.2)、 KCN 培养基的内容。 本部分还增加了对疑似菌落进行留样确认的部分，以备必要时复查，这对生化鉴定不确定的菌落进行进一步验证是非常必要的。 3. 采纳API 20E?或Vitek GNI?为传统生化鉴定方法的选择性替代方法”。 * 2.1 蛋白胨水＋靛基质试 剂：见A.8章 靛基质试验绝大多数沙菌：阴性 －/（＋） 目的：肠杆菌科细菌的鉴定。 原理：有些细菌能产生色氨酸酶，分解蛋白胨中的色氨酸产生吲哚和丙酮酸。吲哚与对二甲基氨基苯甲醛结合，形成红色的玫瑰吲哚。 * 2.2 尿素琼脂(pH7．2)：见A.9章。 尿素酶试验，绝大多数沙菌：阴性－ /（＋） 目的：通过分析尿素酶来进行肠杆菌科细菌的鉴定。 原理：细菌产生的尿素酶分解尿素产生大量的氨，使培养基pH升高，用酚红指示剂测出。 * 2.3 氰化钾(KCN)培养基：见A.10章。 绝大多数沙菌：阴性－ 2.4 赖氨酸脱羧酶试验培养基：见A.11章。 绝大多数沙菌：阳性＋ 反应序号 硫化氢（H2S） 靛基质 pH7.2尿素 氰化钾 赖氨酸脱羧酶 + - - - + + + - - + - - - - +/- 注：+阳性；-阴性；+/-阳性或阴性 表3 沙门氏菌属生化反应初步鉴别表 p4 * 必要时按表5进行沙门氏菌生化群的鉴别。 表5 沙门氏菌属各生化群的鉴别 项目 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ 卫矛醇 + + - - + - 山梨醇 + + + + + - 水杨苷 - - - + - - ONPG - - + - + - 丙二酸盐 - + + - - - 氰化钾（KCN） - - - + + - 注：+表示阳性；-表示阴性 * 2.7 半固体琼脂：见第A.14章。 （供动力观察、菌种保存、H抗原位相变异试验等用。 一般用1.5％的 ，不凝集时用2.5％-3％的；有Vi时酒精灯火焰煮沸。H抗原发育不好时，用0.7％-0.8%上菌落的边缘部分，或0.3％-0.4%远端取菌。 ） 2.8 丙二酸钠培养基：见第A.15章。 （沙菌生化群鉴别培养基，用新鲜的琼脂培养物接种，于36℃±l℃?培养48h，观察结果。 阳性者由绿色变为蓝色。） （沙菌Ⅲ和Ⅴ为阳性 ＋：由绿变兰； ⅠⅡⅣⅥ群为阴性－ ） * API 20E生化鉴定系统 3.1 API20E生化鉴定试剂盒或VITEK GNI+生化鉴定卡1 1. API生化鉴定系统 是法国梅里埃生物公司出品的微生物生化检测系列产品，原理是利用细菌对于各类化学物质（碳水化合物、氨基酸及蛋白质、无机盐等）的代谢能力以及酶类的存在与否等生化特性来鉴定细菌的一种方法，当反应能够导致反应体系的pH变化或产生显色物质，加入合适的酸碱指示剂或显