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慢性淋巴细胞白血病检验方案设计 1.概述 慢性淋巴细胞白血病 （CLL）是常见成B淋巴细胞慢性增殖性肿瘤，以外周 血、骨髓、脾脏和淋巴结等出现大量成熟的小淋巴细胞为主，本病病因及发病机 制尚未完全明确。慢性淋巴细胞白血病在中国发病率显著低于西方国家，起病缓 慢，早期多无症状，逐渐乏力、疲倦，淋巴结或脾肿大，超过半数病人在常规体 检或因其他疾病就诊时被发现。 慢性淋巴细胞白血病主要进行血象、骨髓象、 免疫学分型、分子生物学检测等。 2.病例资料 蒋某，女，68岁，常感头昏、乏力、近10余天来症状较前加重，未引起重 视，2天前出现发热、咳嗽、呕吐不适，具体体温不详，稍有轻咳，咳白色粘液 痰少许，呕吐胃内容物3次，非喷射状，无畏寒、盗汗，无咯血、气促，无呕血、 便血，无腹痛、腹胀、腹泻，无胸闷、心悸、胸痛，就诊我院急诊科，予以完善 血常规、生化检查、骨髓检查等。 3.实验方案 3.1 血常规检验 3.1.1标本采集 无菌采集抗凝静脉血于浅紫色瓶塞真空采血管。 采血后尽快送检 （为保证结果准确，必须在2 内完成检测）。 3.1.2检测方法 （按BC-6900血液分析仪说明操作） 仪器检测原理：主要有电阻抗、激光散射、荧光染色、流式细胞技术。 3.1.3结果见图1 9 12 9 WBC:172.86 ×10/L ,RBC:0.92×10 /L,PLT:36×10/L,淋巴细胞计数、比 例超过仪器检测上限。 图1 血常规检验报告单 3.1.4结果分析 (1)经手工复查血常规与仪器检测结果相符。 （2）白细胞增高，系白血病细胞过度增生，淋巴细胞数超过仪器检测上限，粒 细胞明显减低。 (3) 红细胞减低，CLL病程晚期可出现贫血，最常见原因为白血病细胞浸润骨髓 引起正常造血功能抑制。在欧美国家约20%患者合并自身免疫性溶血性贫血，在 中国合并者罕见。其他原因为脾功能亢进。 (4)血小板减少可源于白血病细胞骨髓浸润，脾功能亢进，少数为免疫性血小板 减少。 3.1.5复查血涂片 操作步骤： （1）用微量吸管吸取一滴血滴至载玻片的一端约1CM处。 （2）左手持载玻片，右手持推玻片，将推片接近血滴处，然后轻轻接触血滴并 压在血滴上，将推片与载玻片形成30度夹角，用均匀的速度将血向载玻片的另 一端推动，推制成一张厚薄适宜的血膜片，血膜应是头、体、尾分明，长度适中， 薄厚事宜，尾巴呈舌头状。 （3）推好的血膜在空气中晃动，以促使干燥。 （4）滴加瑞氏吉姆萨A液在涂片上，使染液覆盖整个标本染色1min。 （5）再将磷酸盐缓冲液 （pH6.8）B液加于A液上，用洗耳球吹液面使两种染液 充分混合，染色7分钟。 （6）水洗：冲洗时不能先倒掉染液，用流水缓缓冲洗，既不能让染料沉着于血 膜上，又要防止血膜被冲刷脱落，干燥后镜检。 结果及分析： 成熟红细胞大小不均，血小板分布减少，白细胞分布明显增多，以成熟淋巴 细胞为主与仪器检查结果相符。 4.生化检查 4.1标本采集 采集静脉血，离心取血清待测。 4.2检测方法 （按日立全自动生化分析仪7600说明操作） 简要操作：开机，仪器自检，检测质控物，质控合格，将待测血清上机操作， 打印结果。 4.3检查结果 （图2） （1）乳酸脱氢酶：19164.00U/L提示明显高于正常，肿瘤、溶血LDH会升高。 （2）C-反应蛋白：104.00U/L升高，提示炎症可能。 （3）肝肾功能大致正常。 图2 生化检验报告单 5.骨髓片检查 5.1.1 实验仪器与耗材 骨髓穿刺包，显微镜，瑞氏染液等。 5.1.2 骨髓取材、涂片 骨髓取材、涂片由临床医生完成。 5.1.3骨髓片瑞氏染色 原理：物理吸附与化学亲和，不同细胞的各种化学成分分别与伊红、美兰染 料结合，细胞会呈现出不同的颜色，染色后的细胞在显微镜下更容易识别。 5.1.4结果及分析 （图3） （1）骨髓片：取材、涂片、染色可以 （2）有核细胞增生明显活跃。粒系占4.5%,红系占5.5%。 （3）粒系增生受抑制 （4）红系增生受抑制 （5）淋系细胞增生明显活跃，占90.5%，分类以成熟淋巴为主，可见少量幼淋。 （6）全片巨核细胞5个，分类可见幼巨1/5,颗粒巨3/5，裸核1/5。血小板散 在分布。 （7）未见寄生