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《微生物学二》实验教学大纲
课程代码:PHAR1009
课程名称:微生物学(二)
英文名称:Microbiology(II)
实验室名称:基础医学教学实验中心(省级)形态学实验室
课程学时:72实验学时:28
一、本课程实验教学目的与要求
微生物学实验课是微生物学的重要组成部分,也是学习微生物课程的一个重要环节。通过实验能加深学生对微生物学理论知识的理解和运用,培养学生认真从事科学实验的能力、独立分析问题和解决问题的能力,培养学生实事求是的科学研究作风。使学生掌握无菌操作技术、细菌染色及形态观察、细菌人工培养法和血清学检测等基本的微生物学方法和技能;熟悉药品的微生物学检查方法;熟悉病毒、真菌等其它微生物的培养、形态观察、血清学检测。
通过系列的实验操作,要求学生能较熟练地掌握研究微生物的基本方法,通过具体观察不同标本,进行各项操作,分析实验结果,完成实验作业各环节,配合课堂讲授,以验证和巩固微生物学的理论知识。
二、主要仪器设备及现有台套数
1、高压消毒锅2 台9、恒温水浴箱3台
2、手提式消毒锅2 台10、冰箱10台
3、实验准备用显微镜3 台11、电子天平1台
4、示教显微镜15台12、普通天平5台
5、学生用显微镜 每人1台13、煤气灶1台
6、净化台 12台14、电炉5台
7、恒温培养箱 5台15、厌氧培养箱1台
8、干烤箱 2台16、台式离心机3台
三、实验课程内容和学时分配
序号
实验项目名称
目的、要求
实验内容
学时分配
实验类型
每组
人数
必开、选开
1
非特异性及特异性免疫
掌握血清学反应的基本操作和结果判断,了解机体非特异性免疫功能的机制和体外抗原抗体反应的原理和常用方法。
1.介绍微生物实验室规则及注意事项;
2.大、小吞噬细胞形态观察
3.示教:单向扩散试验、双向扩散试验、火箭电泳
4.对流免疫电泳
3
基础性
1
必开
2
细菌形态与结构的检查法
掌握显微镜(油镜)的使用方法;革兰染色法及细菌形态;熟悉细菌的特殊结构。
1.显微镜油镜的使用;
2.革兰染色及结果观察;
3.示教标本观察:鞭毛、芽胞、荚膜、螺形菌
3
基础性
1
必开
3
细菌的培养法及细菌代谢产物的检查
掌握细菌接种及观察细菌生长现象的基本方法;熟悉细菌鉴别常用生化反应的现象及结果判断。
1.介绍常用培养基的制备方法及用途;
2.细菌的接种法;
3.细菌学常用生化反应(示教);
3
综合性
1
必开
4
细菌的分布及物理化学因素对微生物的影响
掌握细菌药敏试验的基本方法及结果判断;熟悉微生物实验室常用的消毒灭菌方法;细菌在自然界及正常人体中的分布及检查方法;了解理化因素对微生物生长的影响。
1.介绍实验室常用消毒灭菌方法;
2.紫外线杀菌试验;
3.化学消毒剂抑菌试验;
4.抗菌药物敏感试验;
5.细菌分布(学生设计);
3
设计性
6
必开
5
化脓性球菌
掌握化脓性球菌的形态特征及鉴别方法,掌握血浆凝固酶试验的操作方法及结果观察。
1.三种葡萄球菌菌落形态观察;
2.金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌在血平板上菌落形态及溶血现象观察;
3.淋病奈瑟菌及链球菌革兰染色标本观察;
4.凝固酶试验(试管法);
3
基础性
6
必开
6
其他常见致病性细菌
掌握破伤风梭菌、产气荚膜梭菌;熟悉结核分枝杆菌、支原体菌落;螺旋体的形态;
1.破伤风梭菌、产气荚膜梭菌染色标本观察;
2.支原体菌落、梅毒螺旋体染色标本观察;
3.结核分枝杆菌形态观察;
2
基础性
1
必开
7
放线菌、真菌及病毒
掌握放线菌、真菌的菌落、形态特征;验证病毒感染后产生的细胞病变现象。 掌握白假丝酵母菌的芽管形成方法。
1.放线菌染色标本、真菌三种菌落形态观察
2.真菌大分生孢子、厚膜孢子及新生隐球菌(荚膜)形态观察;
3.正常培养细胞及病毒致细胞病变作用(CPE)观察;
4.狂犬病毒包涵体--内基小体染色标本观察;
5.白假丝酵母菌芽管形成实验
3
基础性
1
必开
8
药(食)品中细菌总数的测定
掌握供试样品中细菌总数的测定方法及结果判断。
1.供试样品的稀释;
2.倾注培养;
3.菌落计数;
4.报告细菌总数;
3
综合性
6
必开
9
药(食)品中大肠杆菌的检查
掌握供试样品中大肠杆菌的分离培养及鉴定程序。
1.样品增菌后的分离培养:伊红美兰平板(或MAC);
2.可疑菌转种于普通斜面培养;
3.生化反应鉴定细菌:革兰染色镜检、乳糖发酵、IMViC试验等;
6
综合性
1
选开
10
药品中沙门菌的检查
掌握分离培养供试样品中沙门菌常用的选择培养基及沙门菌的分离培养及鉴定程序
1.样品增菌后的分离培养:S-S平板;
2.可疑菌转种于克氏双糖铁斜面培养;
3.生化反应初步鉴定细菌;
4.血清学(玻片凝集)试验明确鉴定;
5
设计性
1
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