《实验核医学一》课程教学大纲.doc

《实验核医学一》课程实验教学大纲 课程代码：NUMD1002 课程名称：实验核医学（一） 英文名称：Experiment Nuclear Medicine 实验室名称：放射医学实验室 课程学时：68实验学时：24 一、本课程实验教学目的与要求 通过本实验要求学生掌握放射性样品制备与淬灭校正、氯胺T法标记蛋白质、放射免疫分析、组织磷屏放射自显影、放射性核素标记化合物的示踪动力学分析、小动物活体成像技术的基本实验原理、实验方法、实验操作技能以及预期的教学目标。 二、主要仪器设备及现有台套数 1、液体闪烁仪1台； 2、γ免疫计数器2台； 3、冰冻切片机1台； 4、激光影像扫描成像系统1台； 5、小动物活体成像系统1台； 6、液相色谱-质谱联用仪1台。 三、实验课程内容和学时分配 序号 实验项目名称 目的要求 实验内容 学时分配 实验类型 每组人数 必开、选开 1 放射性样品的制备与猝灭校正 掌握放射性样品的制备与猝灭校正 选择实验动物静脉注射放射性工作液，确定不同时间间隔取血液、脏器等，制备放射性样品，在液体闪烁仪上测量，处理数据。 3 综合性 2 必开 2 Ch-T法标记蛋白质 掌握Ch-T法标记蛋白质，学会本法中标记率、比活度及放化纯度的测定方法和计算 氯胺T法125I标记SOD后用sephadex G50柱分离纯化，反应液用纸层析法测量计算标记率、放射性比活度，纯化后的产品也用纸层析法测量计算放化纯度。 6 综合性 2 必开 3 RIA测定 掌握RIA技术，熟悉放射免疫测定的基本操作和数据处理方法。 甲状腺素放射免疫分析。依据甲状腺素免疫分析药盒说明书进行加样、保温离心沉淀去上清后在γ免疫计数器上测量并处理分析数据。 3 综合性 2 必开 4 组织磷屏放射自显影 掌握组织磷屏放射自显影样品的制备方法、基本原理和操作方法，图像结果的分析； 小鼠尾静脉注射放射性药物，一定时间后处死去皮，固定5-7天后冰冻切片，制膜压膜暗室曝光一定时间后，将磷屏放入Typhoon扫描仪，选择合适的扫描参数扫描，分析图像。 6 综合性 2 必开 5 放射性核素标记化合物的示踪动力学分析 基本掌握示踪动力学分析方法；掌握一次静脉注射的二室线性动力学数据分析及示踪物的评价。 配制一定活度的放射性核素标记化合物工作液，选择动物尾静脉或腹腔注射，在注射示踪剂后的不同时间采集静脉抗凝血，测量其放射性，处理数据并分析。 6 设计性 2 必开 6 小动物活体放射性核素成像技术 掌握标记物在荷瘤鼠体内特定器官分布的活体双模成像及图像融合新技术；了解如何设计一个双标记示踪实验进行活体双模成像，观察生物、化学分子在体内的靶向分布。 使用肿瘤靶向的放射性标记物或/和荧光标记物，制备成工作液，尾静脉注射入荷瘤小鼠体内，选择成像时间，全身麻醉后于活体成像仪上显像，进行双重或多重图像融合处理。 9 设计性 3 选开 7 放射性受体配体结合分析 掌握放射性受体配体结合分析的基本原理和基本方法；掌握受体体内分布及其定量分析方法。 制备待测受体的小鼠脑组织、肝脏离体标本,在缓冲液中与放射性配体进行结合，反应后清洗组织样本，去除游离标记配体，测定放射性受体配体结合数，数据处理，求出有关参数。 9 创新性 3 选开 8 稳定同位素稀释法 了解液相色谱-质谱联用仪的工作原理；掌握稳定同位素稀释法的原理及应用；标准曲线的获得 用稳定同位素稀释法测定血浆中内源性化合物。使用稳定同位素氘标记物作为内标物，制备待测定内源性化合物的不同浓度的工作液，在液相色谱-质谱联用仪上测定，得到标记物测定的标准曲线；制备血浆中内源性化合物并进行测定，根据标准曲线求出血浆中该内源性化合物的含量。 6 综合性 3 选开 9 标记核酸 掌握标记核酸的方法、原理；熟悉sephadex凝胶柱分离的基本操作； 核酸酶法标记DNA后，用Sephadex G50柱分离纯化，反应液用纸层析法测量计算标记率、放射性比活度，纯化后的产品也用纸层析法测量计算放化纯度。 6 创新性 2 选开 四、考核方式 1、实验报告：目的要求、实验原理、实验方法和步骤、实验结果处理与分析。 2、考核方式 （1）实验课的考核方式：平时成绩（出勤、课堂表现）加实验报告分数 （2）实验课考核成绩确定，实验课成绩占课程总成绩的比例等：实验课分数占本课程总分的20% 五、实验教材、参考书 书名. 编者.出版社.出版年份 1、教材：《核医学实验讲义》 自编 2、参考书： （1）《实验核医学》，主编，苏州大学出版社，2004 （2）《核药学》，范我、强亦忠主编，原子能出版社，2005 （3）《分子核医学》王世真主编，中国协和医科大学出版社，2004