中药YN3号对慢性应激大鼠行为学及海马GRNMDAR表达的影响（职称论文资料）.docVIP

中药YN3号对慢性应激大鼠行为学及海马GRNMDAR表达的影响（职称论文资料） 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：中药YN3号对慢性应激大鼠行为学及海马GRNMDAR表达的影响 1 1对象和方法 2 文2：跑台运动对慢性应激抑郁大鼠行为学及海马CA1CA3区NGF表达的影 6 1 材料与方法 8 八臂迷宫实验程序 10 2 研究结果 12 3 讨论 14 参考文摘引言： 17 原创性声明（模板） 19 文章致谢（模板） 19 正文 中药YN3号对慢性应激大鼠行为学及海马GRNMDAR表达的影响（职称论文资料） 文1：中药YN3号对慢性应激大鼠行为学及海马GRNMDAR表达的影响 体内糖皮质激素的分泌具有自身逆反馈调节的特点，其分泌主要受HPA轴（下丘脑-垂体前叶-肾上腺皮质轴）调节，糖皮质激素在血液中浓度的增加反过来又可以抑制下丘脑和垂体前叶，从而减少糖皮质激素的分泌。海马中富含GR（糖皮质激素受体），可以抑制应激条件下HPA轴的过度反应。创伤性应激和慢性应激均可导致海马GR含量改变，报道中创伤性的应激主要引起海马GR表达的升高[1]；慢性应激损伤实验显示，应激早期海马内GR表达增强，慢性应激后期阳性表达减少[2]。海马GR除了可以自我调节，还受到NMDAR (N-甲基-D-天冬氨酸受体)的影响，两者都对HPA轴和LTP(海马神经元长时程增强效应)有影响，参与应激和学习记忆[3]。本实验观察慢性应激对大鼠一系列行为学活动的影响效应，包括自主运动、强迫运动和学习记忆活动，同时观察中药YN-3号对这一过程的干预作用。 1对象和方法 实验动物与分组 雄性SD大鼠，体重160～180g（北京维通利华实验动物养殖中心），筛选40只，随机分为4组，每组10只，分别为：空白组（control）、模型组(model)、YN-3组(YN-3)、氟西汀组(Prozac) 主要实验器材和药品 Noduls Ethovision软件及摄像系统（荷兰Noldus information technology 公司，型号：NOVELBAC）；MG-3Y迷宫刺激器（张家港生物医学仪器厂）；氟西汀(百优解，片剂，美国礼来公司，批号A019602） 模型建立 造模各组孤养并每日随机给予以下刺激的一种：断食（24h）、断水（24h）、昼夜颠倒（24h）、夹尾（3min）、束缚（3h）、10℃冷水游泳（5min）、电击足底（电压为30V，电击5s，间歇5s共进行300s），共21天。 治疗组处理方法 YN-3组灌胃，使用前按照灌胃剂量煎药浓缩，浓度/mL，贮存于4 ℃冰箱中备用，用前加热。氟西汀组于每日进行应激刺激前1h灌胃给药，用药量为/kg，按1mL/100g给药，共21天。 行为学检测 实验使用Noduls Ethovision软件及摄像系统对大鼠3min内在小箱中进行的总路程、站立次数进行记录。每只大鼠行为的检测在区域为80cm×80cm的开放场内，由红外摄像系统和视频合成器记录大鼠的活动情况， 计算机分析系统分析大鼠的运动轨迹。 强迫游泳实验 “Y”型电迷宫实验应用MG-3Y迷宫刺激器，测试成绩分为学习成绩和记忆成绩。宫箱设有3条通道，每臂末端有信号灯，箱底通以交流电。灯光指示为安全区，不通电。将大鼠置于一支臂端，另两支任意一支给灯光信号，示安全区。适应1min后给予电击，以大鼠直接逃至安全区为正确反应，否则为错误。学习成绩以大鼠达到连续9次以上正确反应时所需的电击总次数为准，记忆成绩以学习完后再电击10次中正确反应的次数（10）为准，于应激前后记录测试成绩。 NMDAR免疫组化染色和图像分析 断头后迅速取脑并切取含海马脑段，浸入4％多聚甲醛液中固定，石蜡包埋，额状连续切片，片厚5μm，每只动物间隔取片，每个指标取3张，常规SABC法染色：常规脱蜡和水化，兔抗GR、NMDAR单克隆抗体（1∶100，北京博奥森生物技术有限公司）室温60min，生物素标记二抗室温孵育15min，链霉菌抗生物素－过氧化物酶溶液室温15min，DAB溶液显色（以上SP超敏试剂盒由福州迈新生物技术开发有限公司）。光镜下，归类每张切片海马CA1、CA2、CA3、齿状回等4个亚区的阳性细胞强度，以每100个细胞中阳性细胞个数为标准，分为阴性(n=0)、弱阳性(0n30)、阳性(30≤n60)、强阳性(n≥60)4个等级。 统计学处理 行为学成绩均用均值±标准差(±s)表示，用独立样本t检验(Independent-Samples T Test)做组间差异显著性分析；图像分析结果用多个样本比较的秩和检验(Kruskal-Wallis法)和多个样本两两比较的秩和检验(Nemenyi