高效液相色谱仪验证方案.docVIP

第 PAGE 1页 共6页 起 草： 日期： 审 核： 日期： 批 准： 日期： 生效日期： 签字： 验证小组会签 姓名 部门 职务或岗位 签字日期 拷贝号： 变更记载： 制定（变更）原因及目的： 对高效液相色谱仪的选型、安装、运行进行确认，保证该仪器的检测数据的准确性。 修订号 批准日期 生效日期 00 01 02 分发部门 生产技术部 [ ] 质量部QA [ ] 质 量 部 QC [ ] 一 车 间 [ ] 二 车 间 [ ] 三 车 间 [ ] 设备动力科 [ ] 物 控 部 [ ] 总 经 办 [ ] 综 合 部 [ ] 高效液相色谱仪验证方案 适用范围 本方案适用于LC-10A高效液相色谱仪验证。 目的 通过验证确认LC-10A高效液相色谱仪能够达到仪器性能指标，能符合检验产品需求。 职责 质量部QC：负责验证方案的起草及具体实施 设备动力科：协助验证的实施 QC室主管：负责按验证计划组织实施验证工作 QA验证管理员：负责验证工作的管理，协助验证方案的起草，组织协调验证工作，总结验证结果，出具验证报告 质量部经理：负责验证方案审核 质量总监：负责验证方案及报告的批准 内容 概述 本仪器由日本岛津公司生产，由LC-10ATVP泵、LC-10ATVP检测器、LC-SCL控制器、Class-vp控制程序及电脑组成。当供试品通过高压泵流动相带入色谱柱时，根据色谱柱箱温度以及柱内的填料，多次吸附和脱附，将供试品不同组份分开，进入检测器，绘出色谱图。根据保留时间进行定性分析，根据峰高或峰面积进行定量分析。该仪器主要用于各种原辅料、中间体、成品的含量测定。 预确认 该仪器主要技术指标： 波长范围：190～600nm 波长准确度：±1nm 带宽：8nm 波长重复性：±0.1 nm 基线漂移：≤2×10-4AU/h 基线噪声：≤±0.35×10-5 AU 光源：氘灯 泵压力范围：0.1～39.2Mpa 泵流量范围：0.001～5ml （0.1～39.2Mp）/min 柱温箱温度范围：4～80℃ 技术指标是否符合中国药典2000版要求 复核者： 预确认者： 安装确认 目的 确认仪器整个安装过程是否符合要求，编制仪器的使用SOP，并纳入文件管理系统，对操作人员进行操作培训考核，纳入培训档案。 安装确认：安装确认记录见表一。 运行确认 基线噪声和基线漂移：在254nm处测定，结果见运行确认记录（表二）。 流动相流量：流动相为水，测试温度为25℃。 水在25℃时的密度为0.997041 g/cm3，先将三个10ml容量瓶干燥，分别称定重量后接收流动相，设定流动相流速为0.5ml/min，各接10分钟（用秒表准确计时），精密称定水的重量，水的重量分别为M1 、M2 、M3，计算流量设定值误差（Ss）、流量稳定性误差（SR）均应≤±2%，结果见运行确认记录（表二）。 Ss=（Fm—Fs）/Fs×100% SR=（Fmax—Fmin）/F×100% 式中：Ss：流量设定值误差（%）；SR：流量稳定性误差（%）； Fm= W/ρt·t为流量实测值；Fs：流量设定值（ml/min）； M：流动相的平均重量（g）； ρt：25℃下水的密度（g/cm3）； t：收集流动相的时间（min）； Fmax：测量中流量最大值（ml/min）； Fmin：测量中流量最小值（ml/min）； F：测量中流量算术平均值（ml/min）。 系统适用性试验 以甲醇—水（1：1.1）为流动相，设置流速1.0ml/min，色谱柱为C18柱，在波长280nm处测定牛蒡子苷甲醇溶液（0.5mg/ml），记录色谱图。 色谱柱理论塔板数：n应不低于1500，结果见运行确认记录（表二）。 计算公式：n=5.54×(tR/Wh/2)2 式中 : tR为供试品的保留时间； Wh/2为供试品峰宽。 拖尾因子：T应在0.95-1.05之间，结果见运行确认记录（表二）。 计算公式：T=W0.05h/2d1 式中：W0.05h为0.05峰高处的峰宽；d1为峰极大至峰前沿之间的距离 重复性 测定过程见适用性预试验，测试5次，得5次峰面积数据，计算相对标准偏