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氨挥发抑制率的测定（尿素酶法） A.1方法提要 肥料中的酰胺态氮在尿素酶的作用下水解为钱态氮，在氧化镁存在的条件下， 肥料中原来含有的钱态氮与酰胺态水解产生的镂态氯会转化为氨释放出来，用硼酸 溶液吸收释放出的氨，再用一定浓度的硫酸溶液滴定释放出的氨，从而得到氨挥发 氮量，氨挥发氮占总氮（不含硝态氮）的百分率称之为氨挥发率：样品和对照的氨挥 发率之差就是氨挥发抑制率；为了测定数值准确反响氨挥发抑制情况，总氨里面不包 括硝态氮。 A. 2试剂和材料A. 2. 1试剂和水 本标准中所用试剂、水和溶液的配制，在未注明规格和配制方法时，均应符合HG/T2843的规定。 A. 2. 2尿素酶溶液 称取0. 500g尿素酶，加10mL水，用研钵研磨至糊状，全部转移至500mL容量 瓶中并定容，摇匀，储存于4c冰箱中，备用；A. 2.3氧化镁悬浮液:30g/L； A. 2.4硼酸溶液：2%；A. 2.5 A. 2.5 A. 2.5混合指示剂：溶解0.099g漠甲酚绿和0.066g甲基红与100mL乙醇（95%）中;A. 2.6 硫酸标准滴定溶液：c(1/2H2S04) =0. 02mol/L； A. 2.5 A. 2.7碱性甘油：向100mL A. 2.7 碱性甘油：向100mL甘油中加入1g氢氧化钠, 搅拌均匀后使用。 A.3仪器A. 3.1 一般实验室仪器; A. 3. 2扩散皿；A. 3. 3恒温箱。 A. 4分析步骤A. 4.1试样的制备 用研钵将样品研磨至全部通过0. 50mm孔径筛，混合均匀，置于洁净、干燥容 器中；A. 4. 2试样溶液的制备 称取试样约1g (精确至0. 0001g)于烧杯中，加100mL溶解试样，全部转移至500mL 容量瓶中，定容，摇匀，静置2h后，备用；A. 4. 3培养 吸取5ml试样溶液的上清液与扩散皿外室，吸取2mL硼酸(A. 2. 4)溶液与扩散 皿内室，并滴加2滴混合指示剂(A. 2. 5),然后在扩散皿外室边缘涂上碱性甘油， 盖上毛玻璃，旋转数次，使皿边与毛玻璃完全粘合。移动毛玻璃，通过边缘的缝隙 向扩散皿室外加入2mL尿素酶溶液(A. 2. 2),立即盖严，随后将扩散皿置于25±1℃ 恒温箱中，培养20mino 培养结束后，小心取出扩散皿，移动毛玻璃，通过边缘的缝隙向扩散皿中加入 5mL氧化镁悬浮液(A. 2. 3),立即盖严，并用橡皮筋固定。随后将扩散皿置于40±1℃ 恒温箱中，继续培养1小时后取出。 用硫酸标准滴定溶液(A. 2. 6)滴定内室硼酸溶液吸收的NH3,溶液由蓝绿色变为 微红色为滴定终点。 在样品测定同时，进行空白试验。 A. 5分析结果的表述氨挥发抑制率W,单位％,按公式(A.1)计算。 (V-V?)XCX14xl(X)7 x N x 10 式中: V样品测定时消耗硫酸标准的滴定溶液的体积，单位为毫升(mL)；V。一空白实验消耗硫酸标准滴定溶液的体积，单位为毫升(mL)； c 一硫酸(1/2H2s标准滴定溶液的浓度,单位为摩尔每升(mol -！/)； m 一试样质量，单位为克(g); N一试样的酰胺态氮与镂态氮含量之和，单位为%;14 一氮的摩尔质量，单位为克每摩尔(g-mol)； 10 一将g-kgT转换为外的系数。