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盐胁迫对甘草根生长的影响 PAGE PAGE 10 盐胁迫对甘草根生长的影响 盐胁迫对甘草根生长的影响 麦丽开·亚森 指导老师：海利力·库尔班 摘要：为了研究甘草的抗盐生理特性，对甘草进行不同浓(50Mm,100Mm,200Mm)的NaCl盐溶液处理。测定甘草超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化物酶(POD),过氧化氢酶(CAT)活性的变化。结果表明：SOD，POD和CAT活性变化不尽相同，SOD在低盐浓度下上升，在高盐浓度下下降, POD和CAT随盐浓度的上升而显著增加，都相互协调作用维持在一个平衡态进行。说明适宜浓度的盐有利于甘草正常生长的阈值，在受到盐胁迫时，通过保护酶及渗透调节物质的协调作用维持正常生长。 关键词：甘草；盐胁迫；生长；影响 甘草为豆科(Leguminosae)甘草属(Glycyrrhiza L.)多年生草本植物，是重要的药材资源，别名甜草根、粉草等。高达30～80cm。主要类型有毛甘草, 光果甘草和胀果甘草。甘草长期生长在大陆性干旱、半干旱的荒漠地带的气候条件下,使其具有抗寒、耐热、耐旱、性涝和喜光的特性，我国西北、华北、东北, 这“三北”地区均适合种植。甘草的药用价值含量高，尤其是甘草性味甜,具有补脾益气、润肺止咳祛痰、清热解毒、抗炎、抗癌、抗病毒等活性缓急定痛和调和药性之功效。因其主要含有甘草甜素，又是很好的食品调味剂和添加剂。甘草不仅具有较高的药用、经济价值，而且是干旱地区维护生态平衡的一种优良冬春牧草，茎叶为饲料，是作为优良的防风固沙植物，保持水土、改善土壤结构具有重要的作。还具有十分重要的生态意义。 甘草中国有10种,乌拉尔甘草是我国甘草资源中分布最广泛的一种甘草，我国西北、东北和华北均有分布；胀果甘草主要分布于塔里木盆地及新疆向东可到达甘肃西北部；光果甘草分布中心在地中海北部沿岸，我国北疆和南疆也有分布。除以上所述种类外，还有分布在新疆等地的黄甘草、膜英甘草、落果甘草等。 目前对甘草抗盐生理研究主要以NaC1为主 。本实验研究以甘草为试材，采用以不同浓度的NaC1进行胁迫处理，通过测定SOD，POD和CAT活性，分析探讨甘草对盐适应的生理生化机制，为其规范化栽培和大面积生产提供理论依据[1-6]。 1 试验材料与方法 1.1 试验材料 实验材料为甘草种子(和田地区)和种子公司购置的甘草种子为试验材料。试验于2011年03月26日～2011年04月16日在新疆农业大学园艺学院组培室进行。 1.2 材料的培养和处理 1.2.1 种子的准备 因甘草种子坚硬光滑，外有一层胶质物，种皮不易透水透气，硬实率较高，所以对种子进行轻微刻伤处理。 1.2.2 种子的接种 准备好的甘草种子在组培室中进行接种。接种之前将工作台用75%酒精擦干净,将种子浸泡升汞10分钟后用水来清洗5～8次（每个三角瓶均接种13个种子）。接种后将三角瓶摆置培养架。此过程，组培室必有充足的光照并且温度保持20℃-25℃。 1.2.3 1/2 Hoagland’ s营养液的配制 1/2Hoagland’s营养液的配制表： 试剂 g/L(g) 100倍L 1000倍L 大量元素 Ca(No3)2.4H20 1.18 118 KNO3 0.51 51 MgSO4.7H2O 0.49 49 KH2PO4 0.14 14 微量元素 H3BO3 0.0029 2.9 MnCI2.4H2O 0.0018 1.8 ZnSO4 0.00022 0.22 CuSO4.5H2O 0.00008 0.08 H2MoO4 0.00002 0.02 Fe盐 EDTA-Na 0.03725 3.725 FeSO4.7H20 O.02785 2.785 2 指标测定及方法 SOD采用氮蓝四唑还原法测定，以抑制NBT光化学还原的50%为一个酶活力单位；POD采用愈创木酚法测定，以每分钟OD值降低0.01定义为一个酶活力单位；CAT采用紫外分光光度法测定，以每分钟OD值降低0.1定义为一个酶活力[11]。 2.1酶液提取 称取鲜叶0.1-0.2g于欲冷的研钵中，加入5ml欲冷的提取介质（50mM，pH=7.8的磷酸缓冲液，内含1%聚乙烯吡咯烷酮）研磨至匀浆，再加入提取介质充分研磨冲洗，使终体积为5ml，4℃下15000×g 超速冷冻离心15 min，上清液即为酶提取液[8]。 2.2 SOD 活性测定 SOD活性测定参考Giannopolitis and Ries 等方法[9]。反应总体积为3ml，包含50uM NBT、1.3uM 核黄素、13mM 蛋氨酸75nM EDTA-Na、50mM 磷酸缓冲液和酶液0.1ml，光下反应3min，在560nm下测定光密度，SOD活性以每克鲜重酶单位表示。 SOD计算公式： SOD活性（U.g-1.h-1） 式中O