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盐胁迫对植物体内游离脯氨酸积累的影响 化学与生命科学学院提高性实验报告 第 PAGE 6页 共 NUMPAGES 6页 一、实验课题名称： 盐胁迫对植物体内游离脯氨酸积累的影响 二、文献综述： 【1】作物生长的环境并不总是适宜的。干旱、炎热、霜冻、盐碱、涝灾，以及环境污染、病虫害等都会对作物的生长造成不利的影响。作物的抗逆性是整体性的。可能存在着共同的机制以抵御整个生育期的各种逆境胁迫，现综述如下 ??l．渗透调节 ? 己有大量研究表明，渗透调节是抗旱性的一种重要机制。水分亏缺条件下，叶片和根系渗透调节的生理效应主要是以下两个方面：一是增加吸收，保持膨压，缓和脱水胁迫，改善细胞水分状况；二是改善水分胁迫植物的生理功能，维持一定的生长和光合能力，提高植物在低水势下的生存能力。 ? Jordan（1984）试图从植株整体系统上量化渗透调节的作用，他们用模型模拟得出如下结论，渗透调节的作用并不能找出影响产量的复杂因素，在干旱条件下由于缺乏渗透调节能力，小麦虽然有大量的根系仍不能正常生长（Mcgown，l984）。 李德全等（1994）在盆栽试验条件下研究表明，抗旱性强的品种渗透调节能力均大于抗旱性弱的品种。 李秀菊（1992）在大田试验条件下，测定了3个抗寒性不同冬小麦品种越冬期抗寒力变化与渗透调节的关系。结果表明，抗寒锻炼期间冬小麦抗寒能力逐渐提高，抗寒性越强的品种增强的幅度愈大。伴随抗寒力的增强，渗透势降低，抗寒力愈强的品种下降幅度愈大。与渗透变化有关的可溶性糖等渗透物和水分状况均向降低渗透势的方向发展。 ?2．脯氨酸 有研究表明，通常萎蔫较快的作物脯氨酸积累也较快。Aspinall和Paleg(1987）讨论了胁迫条件下脯氨酸积累作为一个抗旱因素的可能性，得出结论如下，脯氨酸是一种细胞亲和溶质，积累数它可影响渗透调节。换句话说，对液泡中主要渗透物质钾的积累来讲，脯氨酸起细胞质渗透调节平衡作用。 Barderska（1993）认为，脯氨酸可能在防止酶蛋白脱水和渗透胁迫方面起一定的作用，因而把它看做对植物有利的反应，有人还提出把它作为作物抗旱育种的指标，但是后来倾向认为，这是植物受到胁迫损害的一种症兆，而且Bawa和Sen（1993）指 性进行初步鉴定。 张玉梅，林琪，姜雯，张延胜，李忠 渗透胁迫条件下不同抗旱性小麦品种萌发期生理生化指标的变化 [期刊论文] 麦类作物学2006,26(6)：125～130 【3】自1954年发现了黑麦牧草在水分胁迫下叶片累积脯氨酸现象以来，很多研究表明，逆境条件下脯氨酸大量累积能够增强抗逆性，并且阐明了脯氨酸累积的途径和可能的生理作用。如在植物细胞适应胁迫过程中作为渗透调节物质、氮素储藏物质、防止大分子化合物变性、降低由胁迫引起的细胞内酸度、作为呼吸作用的底物、维持膜稳定性和保护植物免受自由基伤害等。植物体内脯氨酸合成主要通过两条途径：谷氨酸途径和鸟氨酸途径，两条代谢途径中的关键酶分别是吡咯啉一5一羧酸合成酶(P5CS)和鸟氨酸转氨酶(OAT)。脯氨酸降解中的关键酶是脯氨酸脱氢酶(PDH)。其中，PDH和OAT定位在线粒体上，P5CS主要存在于细胞质基质中。 关于游离脯氨酸累积与植物抗性关系的研究结果也不尽一致，一部分报道认为脯氨酸累积是积极主动的适应性反应，与抗性有关。另外一种观点认为脯氨酸累积是胁迫反应，与抗性无关。本试验研究表明，脯氨酸累积既有积极一面，又有消极一面。结合不同浓度硝酸钾处理以及相关胁迫指标来看，PEG胁迫下2 mmol/L的硝酸钾促进脯氨酸累积是积极的适应性反应，因为此时的丙二醛含量和细胞膜相对透性显著低于单纯PEG胁迫。但是相对较高浓度的硝酸钾处理，10 mmol·L-1的硝酸钾显著增加脯氨酸含量，这种增加可能是消极的，表现在丙二醛含量和细胞膜相对透性都大于单纯PEG胁迫处理，说明这个浓度下脯氨酸的累积属于胁迫反应。结合脯氨酸代谢途径中的关键酶活性变化规律，可以看出高浓度硝酸钾处理显著抑制了脯氨酸脱氢酶PDH活性，造成了游离脯氨酸大量累积。 曹芳，魏永胜 渗透胁迫下硝酸钾对烟草脯氨酸代谢途径的影响 [期刊论文]--《西北农业学报》 2010，19(9)：144—148 三、实验目的与要求： 1、学习脯氨酸含量测定方法； 2、研究盐胁迫等逆境对植物体内脯氨酸含量的影响。 四、实验条件： 1、实验试剂： 3%磺基水杨酸，甲苯，冰醋酸，酸性茚三酮试剂（25g茚三酮溶于60ml冰醋酸和40ml 6mol/L磷酸中,加热（70℃）溶解。常温保存期24h，冰箱中保存48h），标准脯氨酸溶液（10mg脯氨酸溶于100ml80％乙醇中，浓度为100ug/ml）； 2、实验仪器： 天平，研钵，移液管，水浴锅，离心机，试管，722型分光光度计； 3、实