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RNA提取过程中试剂的作用 提取rna中所用各种试剂的作用： 1、氯仿： 乙醚就是分子量比较小的有机溶剂，在抽取rna时，乙醚可以有效率的并使有机阴之木无机二者快速拆分。dna抽取过程有机看中主要就是酚和蛋白融合，从而使蛋白和dna瓦解，dna步入水相。但是在rna的抽取过程就要防止蛋白和dna瓦解，否则dna可以释放出来至水二者。不管存有酚也好，没酚也好，乙醚本身也对蛋白存有变性促进作用，频繁的盘整，很难使dna的亲水基团，与水相碰触。所以不要频繁盘整。 氯仿的作用有多个方面，一是作为有机溶剂变性蛋白，使其沉淀并通过离心除去，同时也通过变性作用抑制rnase活性；二是rna提取试剂中通常含有苯酚（trizol主要成分就是苯酚，很多自己配试剂提的方法也用苯酚，抽提蛋白时也会用到苯酚），苯酚微溶于水，抽提完之后水相里有痕量的酚，如果不除去会损伤核酸，需要通过氯仿把水相里参与的苯酚抽提掉；三是作为溶剂抽提样品中的一些脂溶性杂质（比如油脂、脂溶性色素等），起到一定除杂作用 通常乙醚里面可以提少量异戊醇（1/25），增加蛋白质在变性过程中由于盘整产生的泡沫，影响时程操作方式。2、 异丙醇：异丙醇的作用是通过-oh的疏水作用使得rna或者dna链中的亲水基团受到保护，等同于沉淀，但是这是个反应时发生在水相中，与前面的氯仿不矛盾 异丙醇就是结晶核酸用的，促进作用和乙醇一样。只不过用量太少一点，0.6v~1v就这么了，不像是乙醇结晶须要至少2v，通常须要2.5倍体积。在水相很多，离心管容积非常有限，提不出太多乙醇的时候通常可以用异丙醇结晶。不过感觉效果不如乙醇，偶尔可以存有结晶不出的时候。 3、酸酚：沉淀蛋白的同时，酸性也有助于去除dna