仪器分析实验实验分子荧光分析法.ppt

编写教师：郑洪副教授 编写日期：2006年9月 化学实验教学示范中心 《仪器分析实验》 实验10 分子荧光分析法 Molecular Fluorimetry For short: M-F 厦门大学精品课程 仪器分析(含实验) 一、分子荧光分析法简介 (对光的吸收) 发生激发 态反应 分子内的激发和衰变过程 1.1 荧光的产生 激发态能量的跃迁与转 化的形式和速率： A1,A2 吸收: 10-15 s VR 振动松弛：? 10-12 s ic 内转化：? 10-11 s isc 系间窜越： 10-6 ~ 10-2 s F 荧光： 10-9 ~ 10-6 s P 磷光： 10-6 ~ 100 s 激发光谱 发射光谱 1.2 荧光光谱 任何荧光化合物，都具有两种特征的光谱：激发光谱和发射光谱。 组成、结构与衍化信息 ☆ 物质的化学结构 ☆ 环境与介质条件 ☆ 与其它溶质的相互作用 ☆ 反应动力学 1.3 荧光定量 F = K﹒I0﹒φf﹒C I0：光源强度； φf：荧光量子产率； C：荧光体浓度） 1）影响相对荧光强度的因素有哪些？ 2）试比较荧光法与紫外-可见分光光度法的分析性能。 ? 问题： （☆注意：在一定浓度范围内适用） 1.4 荧光仪的基本构造 ？问题：荧光光度计与紫外-可见分光光度计在光路设置 上有什么不同？为什么？ 1.5 分子荧光分析法的应用简介 ★ 常规分析应用： ☆ 定性分析：φf；λex；λem；峰形等 ☆ 定量检测： F = K﹒I0﹒φf﹒C ☆ 其它（略） ★ 高端生化研究： ☆ 分子相互作用研究； ☆代谢动力学跟踪； ☆ 显微成像（物理迁移与化学衍化的原位“显迹”） 二、维生素B6注射液中维生素B6含量的荧光法测定 2.1 实验原理 ★ 在近中性的水溶液中有较强的荧光发射: （323nm/392nm 附近） ★在碱性介质中不稳定 ★易发生光降解 VB6 的化学结构 * * 编写教师：郑洪副教授 编写日期：2006年9月 化学实验教学示范中心