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- 2022-12-16 发布于上海
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会计学;革兰氏染色;◆用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染;第3页/共26页;实验三 细菌的简单染色和革兰氏染色;细菌的简单染色和革兰氏染色;一 目的要求;(一)细菌的简单染色原理
(二)革兰氏染色基本原理;细菌细胞微小,且含水量较多,在普通光镜下表现为无色透明,不易观察,所以必须进行染色处理,使细胞着色,便于观察。
简单染色是使用单一染料染色,可用于观察细菌形态、大小、及排列方式.
染色前一般要将细胞固定,其目的是杀死菌体并使之粘附于玻片上,还可以增强菌体的着色能力。固定有加热法和化学法两种,无论采用何种方法均应维持细胞原有形态。 ;(二)革兰氏染色基本原理;占细胞壁的10%;第11页/共26页;1、细胞壁;;革兰氏染色原理:
第一步:结晶紫使菌体着上紫色
第二步:碘和结晶紫形成大分子复合物,分子大,能被细胞壁阻留在细胞内。
第三步:酒精脱色,细胞壁成分和构造不同,出现不同的反应。
G+ 菌:细胞壁厚,肽聚糖含量高,交联度大,当乙醇脱色时,肽聚糖因脱水而孔径缩小,故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内,细胞不能被酒精脱色,仍呈紫色。
Gˉ菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,因其含脂量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,酒精将细胞脱色,细胞无色,蕃红复染后呈红色。;1;三 实验材料;四 无菌操作过程;;(一) 简单染色操作步骤;第20页/共26页;(二)革兰氏染色操作步骤;;六 实验报告;;七 思考题
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