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核糖体发现：Robinson＆Brown（1953）发现于植物细胞。Palacle（1955）发现于动物细胞。Roberts（1958）建议命名为核糖核蛋白体，简称核糖体。第一节 核糖体的类型与结构本节目录一、核糖体的基本类型与成分二、核糖体的结构 三、核糖体蛋白质与rRNA的功能一、核糖体的基本类型与成分类型： ①附着核糖体、游离核糖体 ②70S(图)和80S（图）成分：rRNA、r蛋白（图）70S核糖体80S核糖体剖面图成分：二、核糖体的结构结构与功能的分析方法：▼离子交换树脂可分离纯化各种r蛋白▼双向电泳技术可显示出E.coli核糖体在装配各阶段中，与rRNA结合的蛋白质的类型▼双功能的交联剂和双向电泳分离可用于研究r蛋白在结构上的相互关系 ▼电镜负染色与免疫标记技术结合，研究r蛋白在核糖体的亚单位上的定位三、核糖体蛋白质与rRNA的功能 与蛋白质合成活性有关的位点：①与mRNA的结合位点②A位点 ③P位点④E位点⑤延伸因子EF-G的结合位点 ⑥肽酰转移酶的催化位点三、核糖体蛋白质与rRNA的功能rRNA的功能 r蛋白的功能 回章节目录第二节 多聚核糖体与蛋白质的合成本节目录一、多聚核糖体 二、蛋白质的合成三、RNA在生命起源中的地位一、多聚核糖体◆概念：由多个甚至几十个串连在一条mRNA分子上，称多聚核糖体，这样越长的mRNA可以结合更多的核糖体，提高了蛋白质合成的速度。◆意义:细胞内各种多肽的合成，不论其分子量的大小或是mRNA的长短如何，单位时间内所合成的多肽分子数目都大体相等。多聚核糖体二、蛋白质的合成起始延伸三、RNA在生命起源中的地位RNA DNA蛋白质思考题1.以80S核糖体为例，说明核糖体的结构成分及其功能。2.已知核糖体上有哪些活性部位？它们在多肽合成中起什么作用？3.以多聚核糖体的形式行使功能的生物学意义是什么？4.比较原核细胞与真核细胞的核糖体在结构组分及蛋白质合成上的异同点。5.你认为最早出现的简单生命体的生物大分子是什么？ 细胞生物学技术第一节 显微镜技术 一、显微镜与分辨率 光学显微镜：以可见光（或紫外线）为光源。 电子显微镜：以电子束为光源。分辨率：显微镜或人眼在25cm的明视距离处，能清楚地分辨被检物体细微结构最小间隔的能力。 分辨率是指区分开两个质点间的最小距离。 (分辨率象刀的刀口,它不可能切割比刀口本身还窄的物体,即小于0.2um的结构光镜无法识别。) R=0.61λ /N．A．其中 N．A．＝ｎsinα/2（n=介质折射率；α=镜口角（样品对物镜镜口的张角）；N.A.=镜口率； λ＝入射光波长） 放大倍数＝物镜倍数 ×目镜倍数α/2几种介质的折射率二、光学显微镜技术（一）普通光学显微镜技术（二）荧光显微镜技术（三）相差显微镜技术（四）激光共聚焦扫描显微境技术（一）普通光学显微镜技术1. 构成： ①照明系统 ②光学放大系统 ③机械装置2. 原理：经物镜形成倒立实像，经目镜放大成 虚像。Light Pathway of Microscope（二）荧光显微镜 Fluorescence microscope以紫外光作光源，激发标本中的荧光物质使其发射荧光叶绿体能自发产生红色荧光有些需经过荧光染料：如吖啶橙等染色能使DNA、RNA产生荧光免疫荧光标记（三）相差显微镜把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。在构造上，相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊之处。环形光阑（annular diaphragm）：位于光源与聚光器之间。相位板（annular phaseplate）：物镜中加了涂有氟化镁的相位板，可将直射光或衍射光的相位推迟1/4λ。用途：观察未经染色的玻片标本。（四）激光共聚焦扫描显微境 用激光作光源，逐点、逐行、逐面快速扫描；能显示细胞样品的立体结构；分辨力是普通光学显微镜的3倍；用途类似荧光显微镜，但能扫描不同层次，形成立体图像。laser confocal scanning microscope, LCSMLCSM Image of a Xenopus Melanophore microtubule cytoskeleton (green) and the nucleus (blue)显微制片技术 玻片标本制备技术、染色技术　 液态材料（血液、骨髓）、表皮、黏膜　-----涂片、滴片。　固态材料（肝、脑、肾）　----切片（固定、脱水、包埋、切片、染色） 染色方法较多------甲基绿、苏木精、伊红、 硝酸银、吉姆萨、不同细胞或细胞不同结构用不同染料显示。 光学显微技术为经典技术，仍具很高价值，广泛应用于细胞学、病理学、组织学、微生物学显微操作技术