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酶免检测技术原理及影响会计学3月18日免疫室差错问题分析及整改措施第1页/共39页3月18日免疫室出现了标本漏检问题，导致病人情绪不满，甚至大吵大闹，给科室形象造成了一定的影响。暴露出了免疫室一些问题，如严格按检测流程执行力度问题，认真细心问题等，同时也违背了免疫室规定的检验报告结果时效性原则和以病人为中心的服务宗旨。针对上述事件，经免疫室人员讨论、分析，制定出以下整改措施：1、端正态度、要认真、负责2、严格执行免疫室检验流程，仔细核对标本，不同批次检测标本 标记清楚3、增加人员缓解紧张工作状态4、欢迎大家给出宝贵建议5、坚持免疫室两个原则免疫室简介第2页/共39页检验项目普免术前四项（普免）术前四项（急筛复查）体检AFPCEA体检HAV(IgM)HEV(IgM、IgG)HBcAbTAP化学发光肿瘤性激素HCG贫血三项胰岛素C-肽自身免疫自免肝四项ENA谱抗核抗体抗线粒体抗体血管炎过敏原呼吸道HIV初筛实验室迎检任务前景展望检测方面：免疫球蛋白、补体、免疫细胞、细胞因子、免疫移植等，技术方面：电泳技术、细胞技术、分子生物学技术、流式细胞技等教学方面：华信临床检验技术专业免疫室简介第3页/共39页工作人员 姓名职称职务职责状态孙文鲜主管检验技师常规免疫免疫室组长固定人员刘丽娜主管检验技师发光免疫免疫室质控管理员固定人员史可检验师自身免疫免疫室生物安全及感染控制管理员固定人员冯凡检验员常规免疫免疫室仪器维护及信息管理员固定人员夜班人员科室骨干科室骨干科室骨干暂时固定坚持两个原则：1、坚持检验结果的准确性、及时性、有效性 2、坚持以病人为中心，全心全心全意服务病人第4页/共39页免疫室简介免疫室日常工作量（3月23日为例）项目标本量（人份）项目包括内容备注普筛88门诊、病房普筛，乙肝五项（ 酶免法）急筛复查47所有急筛（酶免法）发光51肿瘤、性激素、贫血三项、胰岛素、C-肽、HCG体检37AFP、CEA、乙肝五项、丙肝、普筛自免3自身免疫、呼吸道、过敏原、杂项9TB、HP、TAP、HPV、HAV、HEV、HBcAb-IgM总计234第5页/共39页免疫室简介免疫室特殊项目检测成本项目成本（％）项目成本（％）项目成本（％）项目成本（％）备注AFP66.29FSH66.29Ferr52.51呼吸道63.98CEA66.29LH66.29Foll89.97过敏原69.63CA15374.76P66.29B1290.05抗核抗体66.60CA19985.59T66.29胰岛素67.94抗ds-DNA158.20CA12585.59PRL66.29C-肽62.20抗平滑肌抗体69.69FPSA85.59E266.29自免肝55.02ENA谱57.50TPSA85.59HCG66.29血管炎61.70抗线粒体抗体待定注：此统计结果可信度为95％第6页/共39页一、抗原抗体反应二、酶免疫技术的分类、原理及特点三、酶联免疫吸附试验四、ELISA法检测注意事项五、ELISA法检测常见问题及解决方法第7页/共39页一、抗原抗体反应抗原抗体反应原理第8页/共39页抗原抗体结合反应是抗原决定簇和抗体分子超变区在化学结构和空间结构上具有互补性，使抗原表位嵌入抗体超变区的槽沟，发生特异性结合，其关系如钥匙和锁。有四种分子间作用力参与并促使抗原、抗体的结合。抗原抗体反应原理第9页/共39页氢键结合力抗原抗体结合力静电引力范德华引力疏水作用力抗原抗体反应特点及影响因素第10页/共39页抗原抗体反应特点：1、特异性 2、比例性 3、可逆性抗原抗体反应影响因素：1、反应物自身因素： 抗原 理化性状、表位种类、数目 抗体 来源、特异性、亲和性、效价2、反应环境条件： 电解质 8·5g/LNaCl溶液 酸碱度 pH6--9为宜 温 度 最适温度为37℃抗原抗体反应影响因素：1、反应物自身因素：抗原 抗体2、反应环境条件：电解质 酸碱度 温 度第11页/共39页二、酶免疫技术的分类、特点及原理1、酶免技术的分类第12页/共39页.组织切片或其它标本中抗原的定位 酶免疫组化酶免疫技术1、酶放大免疫测定技术EMIT2、克隆酶供体免疫分析CEDIA均相小分子激素、半抗原测定酶免疫测定固相酶免疫测定液体标本中抗原或抗体的定性和定量最广泛，酶联免疫吸附试验 异相液相酶免疫测定分离结合、游离酶标记物，底物测定检测微量短肽激素、小分子抗原第13页/共39页酶免技术的分类2、酶免技术特点 抗原抗体反应的特异性 +酶高效催化反应的专一性主要试剂: 酶标记的抗体或抗原酶标物特点： 免疫学活性 酶对底物的催化活性3、酶免技术原理及特点第14页/共39页第15页/共39页二、酶联免疫吸附试验第16页/共39页1、基本原理反应加入待测抗体或抗原和酶标抗原或抗体原理1包被2.洗涤使结合在固