任务4 蜂蜜中淀粉酶值的测定.pptxVIP

农产品检测技术项目九 其他农产品检验任务4 蜂蜜中淀粉酶值的测定项目九其他农产品检验一、测定意义二、测定方法及测定原理三、仪器用具四、试剂五、操作步骤六、结果计算蜂蜜中淀粉酶值的测定一、测定意义 蜂蜜是极易掺假的食品。由于利益的驱动，近年来有些不法商家，向蜂蜜中掺入蔗糖、转化糖、果糖、葡萄糖、葡糖糖浆、果葡糖浆等，制造掺假蜂蜜，有些厂家甚至以葡萄糖、葡糖糖浆、果葡糖浆、蜂蜜香精等替代材料制造假蜂蜜，以天然蜂蜜的形式投放市场，坑骗消费者以获取暴利，损坏了我国天然蜂蜜的产品信誉。这些假蜂蜜产品的感官指标和部分理化指标上与天然蜂蜜产品的极为相似，有研究表明天然蜂蜜中的淀粉酶来源于蜜蜂，而不是花粉或花蜜，说明蜂蜜淀粉酶是蜂蜜产品中特有的成分。假蜂蜜通过添加工业淀粉酶其淀粉酶活力指标虽然可以达到甚至超过国家标准的要求，但是其中的淀粉酶性质与天然蜂蜜的淀粉酶性质是完全不同的。蜂蜜中淀粉酶值的测定二、测定方法及测定原理测定方法： GB/T 18932.16-2003《蜂蜜中淀粉酶值的测定方法 分光光度法》。测定原理：将淀粉溶液加入蜂蜜样品溶液中，部分淀粉被蜂蜜中所含的淀粉酶水解后，剩余的淀粉与加入的碘反应而产生蓝紫色，随着反应的进行，其蓝紫色反应逐渐消失。用分光光度计于660nm波长处测定其达到特定吸光度所需要的时间。换算出1g蜂蜜在1h内水解1%淀粉的毫升数。蜂蜜中淀粉酶值的测定三、仪器用具1、分光光度计2、分析天平（感量0.0001g）3、恒温水浴锅蜂蜜中淀粉酶值的测定四、试剂1、碘储备液：称取8.8g碘于含有22g碘化钾的30mL～40mL水中溶解，用水定容至1000mL。2、碘溶液：称取20g碘化钾，用水溶解，再加入5.0mL碘储备液，用水定容至500mL。每两天制备一次。3、乙酸盐缓冲液（pH5.3，1.59mol/L）：称取87g乙酸钠（CH3COONa．3H2O）于400mL水中，加入10.5ml冰乙酸，用水定容至500mL。必要时，用乙酸钠或冰乙酸调节pH至5.3。4、氯化钠溶液（0.5mol/L）：称取14.5g氯化钠，用水溶解并定容至500mL。5、淀粉溶液：溶解2.000g可溶性淀粉于90mL水中，迅速煮沸后再微沸3min至室温后，移至100mL容量瓶中并定容。蜂蜜中淀粉酶值的测定五、操作步骤1、试样的制备 将样品搅拌均匀。分出0.5kg作为试样，制备好的试样置于样品瓶中，密封，并加以标识。蜂蜜中淀粉酶值的测定五、操作步骤2、淀粉溶液的标定 吸取5.0 mL淀粉溶液和10.0 mL水并分别置于40℃水浴中15 min。将淀粉溶液倒入10.0 mL水中并充分混合后，取1.0 mL加到10.0 mL的碘溶液中，混匀，用一定体积的水稀释后，以水为空白对照，用分光光度计于660 nm波长处测定吸光度，确定产生0.760士0.02吸光度所需稀释水的体积数，并以此体积数作为样品溶液的稀释系数。当淀粉来源改变时，应重新进行标定。蜂蜜中淀粉酶值的测定五、操作步骤3、淀粉酶值的测定（1）分光光度计条件：波长：660 nm；参比物：水。（2）样品处理：称取5 g试样，精确到0.01 g。置于20 mL烧杯中，加入15 mL水和2.5ml乙酸盐缓冲液后，移人含有1.5 ml氧化钠溶液的25 mL容量瓶中并定容（样品溶液应先加缓冲液后再与氯化钠溶液混舍）。（3）吸取5.0 ml淀粉溶液、10.0 mL样品溶液（上一步制备）和I0.0 mL碘溶液，分别置于40℃水浴中15 min。将淀粉溶液倒入样品溶液中并以前后倾斜的方式充分混合后开始计时。蜂蜜中淀粉酶值的测定五、操作步骤3、淀粉酶值的测定（4）5 min时取1.0 mL样品混合溶液（上一步制备）加入10.0 mL的碘溶液中，再用淀粉溶液标定时确定的稀释水的体积数进行稀释并用前后倾斜的方式充分混匀后，以水为空白对照，用分光光度计于660 nm波长处测定吸光度。（5）如吸光度大于0.235（特定吸光度），应继续按上一步骤重复操作，直至吸光度小于0.235为止。（6）待测期间，样品混合溶液、碘溶液和水应保存在40℃水浴中。蜂蜜中淀粉酶值的测定六、结果计算 在对数坐标纸上，以吸光度（%）为纵坐标，时间（min）为横坐标，将所测的吸光度与其相对应的时间在对数坐标纸上标出，连接各点划一直线。从直线上查出样品溶液的吸光度与0.235交叉点上的相对应时间，结果按下式计算：X=300/t式中：X—样品溶液中的淀粉酶值，单位为毫升每克小时[ml/ (g·h)]；t—相对应时间，单位为分（min）。 计算结果保留2位有效数字。在重复性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限（r）。蜂蜜中淀粉酶值的测定六、结果计算r=0.5508 m-5.7854式中：m—两次测定值的平均值，单位为毫升每克小时[mL