脂肪氧化酶活性的测定.pdfVIP

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  • 2023-03-08 发布于上海
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脂肪氧化酶活性的测定 脂肪氧化酶(lipoxygenase,LOX,E.C.1.13.11.12),系统命名为linoleate:oxygen ox-idereductase, 即亚油酸-氧化还原酶,LOX 广泛存在于植物特别是高等植物体内,其活力直接影响食品原料如 大豆、小麦、水稻等种子的贮藏和加工品质。 脂肪氧化酶是一种含非血红素铁的蛋白质,专一催化具有顺,顺-1,4 一戊二烯结构的多元不饱 和脂肪酸加氧反应,氧化生成具有共轭双键的过氧化氢物。 LOX 的活性可用多元不饱和脂肪酸如亚油酸、亚麻酸及花生四烯酸等作为反应基质,利用氧电 极和分光光度法来测定。 1.仪器设备 紫外-可见分光光度计、巴氏移液管、氧电极仪等。 2.操作方法 1)分光光度法 (1)试剂的配制:10mmol/L 亚油酸钠。称取70mg 亚油酸,加等量吐温20和4ml 无 O 水。 2 于巴氏移液管内来回抽打混匀,注意避免产生气泡。加足量0.5mol/LNaOH 至溶液透明(0.55ml), 定容至25ml,分装到带螺帽的小试管当中,每份1~2ml,充N2 后密封,冷藏备用。10mmol/L 花生四烯酸钠,方法同上,用花生四烯酸代替

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