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谷氨酸脱氢酶的提取和活性测定 谷氨酸脱氢酶[GDH，L-谷氨酸：NAD （P）-氧化还原酶]。在许多植物组织中都存在。它催 化酮戊二酸和氨生成谷氨酸，其反应如下： 此反应达到平衡时，有助于谷氨酸的形成，NADH 的氧化与底物还原成正比，因而可通过 在340nm 或366nm 处吸光度的减量而进行测定。 此反应在植物体内的氨同化和转化成有机氮化合物的代谢中起重要作用，谷氨酸是高等绿色 植物无机氮同化的最初产物，是植物体内许多其他氨基酸生物合成的主要氨基供体。 1.仪器设备 搅拌器、高速离心机、紫外分光光度计等。 2.操作方法 1）酶粗提液的制备：每10g 植物材料加30mlTris-HCl 缓冲液 （0.2mol/L，pH8.2），用搅拌 器搅拌，得到的匀浆用纱布过滤，压出液在0℃下用20000×g 离心20min，取上清液，供测酶活 性用 （以上操作在0～4℃下进行）。 + 2）酶活性的测定：反应液2.8ml （含60mmol/LL-谷氨酸，1.6mol/LNAD ，360mol/L Tris-HCl 缓冲液，pH8.2），加入0.2ml 酶的粗提取液，摇匀，在