丙二醛的测定.pdfVIP

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  • 2023-03-08 发布于上海
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丙二醛的测定 丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标,在酸性和高温条件下,可以与硫代巴比妥酸(TBA) 反应生成红棕色的三甲川 (3,5,5-三甲基恶唑2,4-二酮),其最大吸收波长在532nm。但是 测定植物组织中MDA 时受多种物质的干扰,其中最主要的是可溶性糖,糖与TBA 显色反应产 物的最大吸收波长在450nm 处,532nm 处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫 时可溶性糖增加,因此测定植物组织中MD-TBA 反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。 低浓度的铁离子能够显著增加TBA 与蔗糖或MDA 显色反应物在532、450nm 处的消光度值, 所以在蔗糖、MDA 与TBA 显色反应中需要有一定量的铁离子,通常植物组织中铁离子的含量 3+ 为100~300μg/gDW,根据植物样品量和提取液的体积,加入Fe 的终浓度为0.5nmol/L。 1.仪器设备 紫外可见分光光度计、离心机。 2.操作方法 1)MDA 的提取:称取剪碎的受干旱、高温、低温等逆境胁迫的植物叶片1g,加入 10%TCA 2ml 和少量石英砂,研磨至匀浆,再加8ml 三氯乙酸 (TCA)进一步研磨,匀浆以4000×

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