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α-和β-淀粉酶活性的测定 α-淀粉酶能将淀粉分子的α-1.4 糖苷键任意切断成长短不一的短链糊精及少量麦芽糖和葡萄糖， 使淀粉对碘呈蓝紫色的特异反应消失，以该颜色消失的速度计算酶的活力。β-淀粉酶是从淀粉的 非还原性末段分解2 个葡萄糖单位的α-1.4 糖苷键生成麦芽糖。因此可用DNS法测定溶液中还原 糖的含量。 1.仪器设备 分光光度计、恒温水浴等。 2.操作方法 1）粗酶液制备 取新鲜植物材料10g，洗净、剪碎，按1：2 （w/v）比例加20ml0.1mol/LNaAc 缓冲液（含6mmol/L CaCl ，pH5.0）及少量石英砂研磨，一层尼龙布过滤。滤液在20000r/min 离心20min，取上清 2 液用10mmol/LNaAc 缓冲液透析。过夜后用20000r/min 离心10min，取上清液定容，备用。 2）绘制β-极限糊精标准曲线 称取100mgβ-极限糊精，加少量水调成糊状，倾入 10ml 沸蒸馏水，不断的搅拌、加热，煮至透 明。流水冷却后定容至10ml，即每毫升含10mgβ-极限糊精。取25～200μlβ-极限糊精（0.25～2.0mg） 加水定容至0.5ml，再加5.0ml 0.01%I -KI 溶液于560nm 处测定其光密度 （OD）值。以光密度为