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- 2023-03-08 发布于上海
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α-淀粉酶生物检定法
GA 可诱导大麦种子糊粉层细胞中α-淀粉酶的生物合成。合成的α-淀粉酶输送至胚乳,可将胚乳
内淀粉分解成单糖。根据糖的含量变化可定量测定GA。
1.仪器设备
刀片、滤纸等。
2.操作方法
如图10-4 所示用刀片将大麦种子分为两半,一半带胚,另一半不带胚。无胚乳的半粒种子用1%
次氯酸钠灭菌10min 后,用无菌水洗净。将切口朝上安放在灭过菌的1%琼脂培养基上,用
3mm×3mm 的小圆滤纸片盖在切口上,25℃下培养数天后将滤纸片取出,溶于1ml 水中,用
Somogyi-Nelson 或是3,5二硝基水杨酸法测定还原糖的含量。GA 的浓度与生成的还原糖之间
呈线性关系,可做标准曲线 (见图10-5)。GA 的前体贝壳杉烯 (kau-rene)也有反应。ABA 对
GA 诱导的α-淀粉酶活力有抑制作用。
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