氨态氮的测定.pdfVIP

氨态氮的测定 植物吸收的氮主要是氨盐和硝酸盐。后者要经过还原过程形成氨，前者经同化后形成谷氨酰 胺和谷氨酸，然后形成其他氨基酸和蛋白质。氨也是固氰生物固定空气中分子氰后的直接产物。 测定氨的方法有多种，在本章中已多处提及，现在介绍另一种经过改良的茚满三酮测定法，即在 茚满三酮试剂中添加乙二醇并补加正丁醇和丙醇，可以克服不稳定性和毒味生成。 1.仪器设备 研钵、烧杯、移液管、分光光度计。 2.操作方法 称取0.5g 新鲜植物材料样品，放入研钵中，加入5ml 10%醋酸，研磨后以水稀释到100ml， 混匀，通过滤纸过滤到烧杯中。弃去最先滤下的一部分滤液。从剩下的滤液中取2ml 放入试管 中，加3ml 水合茚满三酮试剂 （1.2g 重结晶的茚满三酮放到锥形瓶中，加入 15ml 正丙醇，摇匀， 使之溶解，后加入30ml 正丁醇和60ml 乙二醇，混匀。再加9mlpH5.4 醋酸缓冲液，混匀。保 存于棕色瓶中，置冷凉处，适用期限10 天）和0.1ml1%抗坏血酸，摇匀。盖上球形盖，放入沸 水中加热15min。同时将盛有对照溶液 （2ml 水＋3ml 茚满三酮试剂＋0.1ml1%抗坏血酸）的试 管加热。取出搅拌冷却15min。加热形成的红色茚满三酮被氧氧化而退色，茚满三酮与氨基酸形 成的蓝紫色反应产物仍然存留并变得