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5-核苷酸酶活性的测定 5-核苷酸酶在人与动物组织细胞中主要分布在质膜上，它在细胞分级分离研究中常被用作质 膜的标志酶。最近研究表明该酶也主要分布于水稻幼叶细胞的质膜上。该酶的功能目前还不十分 了解，推测其可能在核酶生物合成、RNA 降解以及ATP 代谢过程中起作用，在植物抗逆性研究 中，曾有用以作为抗冷性指标的报道。5-核苷酸酶催化5-核苷单磷酸水解生成相应的核苷和正 磷酸，因此，通过测定反应生成的无机磷含量可以测定该酶的活性。 1.仪器设备 分光光度计、恒温水浴、离心机。 2.操作方法 1）材料准备：水中浸泡1d 的水稻种子，用湿纱布包裹后置于28℃恒温箱中催芽1d，将种 子分别排列在放有少量清水的培养皿中，然后于28℃恒温箱中生长3d，幼芽长约2cm 左右时用 作试验材料。 2）酶液制备：取0.5g 幼芽，剪碎，加入3ml 的试剂I[50mmol/LHepes-KOH （pH7.5）内含 25mmol/LKCl，5mmol/L MgCl ]进行匀浆，匀浆液用1层纱布过滤，得到的滤液以15000×g 离 2 心20min，上清液为酶液。 3）酶活性的测定：1.0ml 的酶反应液[试剂Ⅱ （30mmol/L Hepes-KOH （p