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超氧物歧化酶及其同工酶的活性测定和同工酶显示 超氧物歧化酶 （SOD）是1969 年McCord 和Fridovich 首次在牛红细胞中发现的。它广泛存 在于一切好气生物中，是防御超氧阴离子自由基对细胞伤害的抗氧化酶，有 CuZn-SOD、Mn-SOD 和Fe-SOD 三种类型。从大豆幼苗胚轴中纯化的CuZn-SOD，分子量为32000，它由两个相同的 亚单位通过非共价键结合而组成。SOD 催化下列反应： 一、SOD 活性的测定 1.仪器设备 -2 -1 光照培养箱 （内壁四周裱糊锡铂纸，令箱内均匀照光约40μmolm s ）、旋转的圆盘透明试 管架 （有机玻璃制造）、玻质和规格一致的试管、分光光度计、低温高速离心机。 2.操作方法 1）粗酶液的制备：取大豆、绿豆、花生3 天龄的黄化幼苗下胚轴样品，加入5倍于样品量 的50mmol/LpH7.8磷酸缓冲液[含0.1mmol/LEDTA；0.3% （w/v）TritonX-100；4% （w/v）聚乙 烯聚吡咯烷酮 （pvpp，polyvinylpolyrrolidone）]，研磨后以纱布过滤，并以10500×g 离心20min， 上清液为