植物叶片中δ-氨基乙酰丙酸的测定.pdfVIP

植物叶片中δ-氨基乙酰丙酸的测定 绿色植物进行光合作用和积累光合产物必须有叶绿素的存在，因此对叶绿素形成过程中一系列的 反应进行定量测定是很必要的。δ-氨基乙酰丙酸 （ALA）是叶绿素形成的前体，在叶绿素的生物 合成中起重要作用，它的合成是叶绿素形成的限速步骤。植物体在合成叶绿素的过程中，首先 ALA 在脱水酶的作用下，由两个分子ALA 缩合成一个分子胆色素原。由于这一反应的转化速率 非常高，在一般情况下很难测出 ALA 的存在，因此必须先用乙酰丙酸处理植物材料。乙酰丙酸 是ALA 脱水酶的竞争性抑制剂，它使得ALA 不能向胆色素原转化，从而在体内积累。 1 仪器设备 分光光度计、台式离心机、研钵、容量瓶等。 2 操作方法 2.1材料的诱导：以小麦幼苗叶片为例，将小麦种子在水中浸泡24h 后，平铺在尼龙网上，置于 -1 -2 -1 盛水的搪瓷盘中，液面正好浸没种子，并于30μmol·s ·m 光照 （12h·d ），25℃恒温下培养。 选择整齐的5d 龄幼苗，取1g 芽鞘以上叶片，均匀漂浮在20mmol/L 乙酰丙酸试剂中进行诱导， 恒温光照6～9h 后用于测定。 2.2ALA 的提取与测定：经诱导的小麦叶片用蒸馏水冲洗3 次，用滤纸吸干，加5ml5