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咏怀程樊兰为王者香,芬馥清风里。从来岩穴姿,不竞繁华美。思考:如何能让名贵的兰花大量、快速的繁殖,从而走向寻常百姓家?植物组织培养技术知识海洋细胞工程原理 细胞工程是指应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法,通过细胞器、细胞或组织水平上的操作,有目的地获得细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性的生物工程。操作水平目的动物细胞工程植物细胞工程植物体细胞杂交植物组织培养一、植物细胞工程的基本技术知识海洋植物组织培养 植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成完整植株的技术。植物细胞的全能性原理复习旧知细胞全能性1、什么是细胞全能性?原理是什么?2、不同细胞全能性大小比较?(1)受精卵 生殖细胞 体细胞 胚胎干细胞 (2)动物细胞 植物细胞3、为什么生物体内细胞并没有表现出全能性,而是分化成为不同的组织器官?4、植物细胞表现出全能性的条件?复习旧知细胞全能性 细胞经分裂和分化后,仍具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。原因每一个细胞含有控制该生物发育的全部基因比较生物体内细胞并不都表现全能性(1)受精卵>胚胎干细胞>生殖细胞>体细胞(2)植物细胞>动物细胞原因:在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性表达复习旧知细胞全能性种子萌发成幼苗,能否体现细胞的全能性?植物细胞表现出全能性的条件:?离体?一定的营养物质、植物激素?适宜的温度、pH、无菌等外界条件知识海洋植物组织培养的过程自主阅读教材35页—36页,小组思考并讨论以下问题:1、概述植物组织培养的基本过程?2、决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么?3、在组织培养实验中,为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作?知识海洋植物组织培养的过程诱导生芽外植体诱导愈伤组织诱导生根试管苗移栽植物组织培养流程图胚状体 脱分化 再分化 是否有光 结果 探究·实践菊花的组织培养—基本过程无有形成根、芽形成愈伤组织已经分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。愈伤组织生芽脱分化再分化未分化细胞形成的不定型的薄壁组织块离体的植物器官、组织或细胞外植体类似胚的结构生根菊花的组织培养—植物激素的作用探究·实践生长素与细胞分裂素比值低生长素与细胞分裂素比值高 对照高根低芽中愈伤知识海洋探究·实践菊花的组织培养—操作步骤外植体消毒外植体切块接种洒精消毒、无菌水清洗次氯酸钠消毒、无菌水清洗 无菌培养皿灭菌的解剖刀 超净工作台酒精灯火焰旁 为什么进行无菌操作?防止杂菌生长。一方面与培养物竞争营养;另一方面产生有害物质危害培养物。知识海洋探究·实践菊花的组织培养—操作步骤诱导愈伤组织形成外植体接种:将外植体的1/3~1/2插入诱导愈伤组织培养基 避光培养 诱导生芽、生根1.照光培养2.生芽、生根培养基不同 一定不能倒置 试管苗移栽知识海洋脱分化再分化花药试管苗愈伤组织单倍体花药离体培养植株矮小、高度不育新课导入“番茄-马铃薯”的假想图植物体细胞杂交技术知识海洋植物体细胞杂交 将不同来源的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新植物体的方法。细胞膜的流动性、植物细胞的全能性原理自主阅读课本37—38页内容,思考并小组讨论以下问题:1、为什么要去除细胞壁?用什么方法可以温和地去除细胞壁而不伤害原生质体?2、诱导原生质体融合的方法有哪些?3、如何将杂种细胞培养成杂种植株?知识海洋植物体细胞杂交的过程去壁A细胞A原生质体再分化脱分化融合再生新壁移栽去壁融合原生质体B细胞再生出细胞壁B原生质体愈伤组织杂种植株杂种植株植物细胞融合植物组织培养原生质体知识海洋植物细胞融合原生质体制备细胞壁原生质体制备 用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁,得到原生质体。细胞膜光镜下烟草叶肉细胞原生质体原生质层利用酶的专一性细胞质液泡细胞核原生质体原生质层 指的是脱去细胞壁的细胞。动物细胞也可看做是原生质体。 成熟植物细胞的细胞膜、液泡膜和介于这两层膜之间的细胞质。知识海洋植物细胞融合原生质体融合电融合法、离心法去壁方法A原生质体A细胞融合聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+-高pH值融合法去壁融合原生质体B原生质体B细胞原理 细胞膜的流动性物理方法融合后,培养基中有几种类型的细胞?化学方法 A、B、AA、BB、AB。(只考虑两两融合)需要进一步筛选知识海洋植物细胞融合原生质体融合 融合完成的标志是重新产生细胞壁,形成杂种细胞。 此过程中起主要作用的细胞器是?高尔基体50 从杂种植株的染色体组成上看属于何种变异? 杂种细胞染色体数为? 杂种细胞染色体组数为?4A为2a=20 B为2b=30染色体数目变异知识海洋植物组织培养脱分化再分化移栽融合后杂种
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