蛋白质的合成.pptxVIP

蛋白质的合成;一、蛋白质合成体系 二、蛋白质的生物合成 三、蛋白质定位 ;一、蛋白质合成系统;（一） mRNA;真核生物mRNA的结构; 不同的蛋白质有各自不同的mRNA，mRNA除含有编码区外，两端还有非编码区。 非编码区对于mRNA的模板活性是必需的，特别是5-端非编码区在蛋白质合成中可能是与核糖体结合的部位。;（二）遗传密码; 1961年Crick 证明三联体密码子学说是正确的；且非重叠的、连续编码无标点的。 mRNA分子上以5→3方向，从AUG开始每三个连续的核苷酸（三联体）组成一个密码子(codon) 。 mRNA中的4种碱基可以组成64种密码子。这些密码代表了20种氨基酸，同时决定了翻译过程的起始与终止位置。 每种氨基酸至少有一种密码子，最多的有6种密码子。通过遗传学和生物化学实验，1966年编排出了遗传密码字典。; （1）均聚核苷酸指导均聚肽合成 首先，polyU作为模板，加入体外无细胞翻译系统中。将翻译产物分析后，发现合成的肽链中的氨基酸残基全部是Phe。确认了第一个Phe的密码子（UUU）。接着，polyA和polyC证明是polyLys和polyPro。确定了AAA是Lys的密码子，CCC是pro的密码子。; 以A和C原料合成polyAC。polyAC含有8种不同的密码子：CCC、CCA、CAA、AAA、AAC、ACC、ACA和CAC。实验中AC共聚物作模板翻译出的肽链由6种氨基酸组成，即Asp、His、Thr、Pro和Lys。根据共聚物成份不同的比例和翻译产物中氨基酸比例亦不同的关系，不能确定A和C的排列方式。; 在缺乏蛋白质合成所需的因子的条件下，特异 aa-tRNA可与核糖体-mRNA复合物结合。它并不一定需要长的mRNA分子，三核苷酸就可以与核糖体结合。 ;第12页/共87页;遗传密码字典;3.密码的基本性质; AUG是起始密码子，也是Met（或者fMet）的密码子。 原核和真核生物肽链合成的第一个氨基酸都是Met（或者fMet）；少数细菌中也用GUG做为起始码（起始位点编码fMet，密码表中编码Val）；真核生物偶尔也用CUG作起始蛋氨酸的密码。 密码子UAA，UAG，UGA是肽链成的终止密码，不代表任何氨基酸，也称无意义密码子。; 简并性：一种氨基酸有几个密码子的现象。 在64组密码子中，除UAA、UAG和UGA三组为终止密码子外，有61组密码子分别代表20种氨基酸，出Met和Trp只有1个密码子外，其它氨基酸都有好几组密码子。编码同一种氨基酸的密码子称为同义密码子。这种现象称为密码子的简并性。同义密码子的存在减少了由于碱基取代造成的有害突变。此外，不同生物对同义密码子的使用频率可能有不同的选择，在进行基因工程操作时应考虑选择最有效的密码子（也称偏爱密码子）。; 通用性：即不论是病毒、原核生物还是真核生物密码子的含义都是相同的。但真核线粒体的密码子有例外：线粒体中UGA不是终止密码子，而编码Trp。 肽链内的Met由AUG和AUA二个密码子编码，起始部位的Met由AUG、AUA、AUU和AGG均可编码；AGA和AGG不是Arg的密码子，而是终止密码子，即UAA、UAG、AGA和AGG均为终止密码子。 ;（6）密码与反密码子的相互识别——变偶性; “摆动假说”认为：碱基间除标准配对外，还可以有非标准的配对。;（三） tRNA的结构与功能;第21页/共87页;第22页/共87页; 通常将tRNA所转运的氨基酸标在右上角，如tRNACys表示转运Cys的tRNA。原核细胞内约有60种不同的tRNA，真原核细胞内则多达100-120种。运输同一种氨基酸的不同tRNA称为同工受体tRNA。 蛋氨酸虽只有一组密码子（AUG）却至少有两种tRNA，一种负责将运到肽链中间，用tRNAmMet 表示；另一种携带甲酰蛋氨酰参与蛋白质合成的起始，用tRNAfMet表示；真核细胞的起始tRNA表示为tRNAiMet，携带甲酰蛋氨酰参与起始作用，用于肽链延伸的则表示为tRNAMet。;1. tRNA的二级结构的特点;（1）3端含CCA-OH序列; （2）TψC环；TψC环由7个碱基组成，参与tRNA与核糖体表面的结合。 （3）额外环或可变环(extro