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第五章微生物的遗传 2)营养缺陷型突变株 突变株不能合成生长所必需的基本化合物如一个氨基酸或维生素。这些突变株不能直接分离,但能通过影印培养法(replica plating)筛选。 基因突变及修复 第五章微生物的遗传 3)不能利用特殊底物如乳糖和麦芽糖生长的突变株,可以通过影印培养法鉴别。 基因突变及修复 第五章微生物的遗传 2、影印培养法 用于筛选大量特殊突变菌落的一个方法。细菌铺制成平板,在所含营养成分的培养基上亲本和突变株均能生长,采用一个稀释度使单个菌落能在平板上看到;培养后,用一个无菌的丝绒布包裹的圆柱章的圆垫转移上述菌落至可以检出突变株的培养基平板上。 基因突变及修复 第五章微生物的遗传 培养基的性质根据突变株的需求,在营养缺陷型突变株的情况下,可以在有特殊生长因子和没有特殊生长因子的平板上影印法转移菌落,不能合成那种生长因子的突变菌株,在基本培养基上不能生长,但能在加入已知生长因子的基本培养基上生长(加富培养基),突变株菌落通过在基本培养基不能生长来鉴别,可以从能生长的补充培养基平板上选出和纯化。 基因突变及修复 第五章微生物的遗传 基因的转移和重组 重组(遗传重组):是指使两个独立的基因组中的遗传成分汇合在一个生物细胞中,以产生基因的新组合,可以是一个完整基因或一组基因,有时甚至是整个染色体在不同生物之间的重组。 杂交:是通过不同性细胞的结合,实现基因重组的方式。 第五章微生物的遗传 基因的转移和重组 原核生物的基因重组方式 一、转 化 二、转 导 三、F质粒与接合 第五章微生物的遗传 基因的转移和重组 转 化(Transformation) 1、转化 转化是从周围培养基吸收游离的DNA片段,整合到自己染色体基因组的结果。许多细菌如芽孢杆菌属、链球菌属、奈瑟氏球菌属和嗜血菌属(嗜血杆菌属Haemophilus)能够自然发生转化作用。 转化作用 单链DNA进入细胞 与受体DNA的同源部份配对 供体DNA与受体DNA形成共价键,交换下一小段单链受体DNA 第五章微生物的遗传 基因的转移和重组 2、感受态 (compentence) 细胞吸收DNA进行转化的能力取决于细胞所处的特殊生理状态,即细菌细胞的感受态。 感受态与细胞表面存在DNA的受体有关。其它细菌,如大肠杆菌,在冷的条件下通过化学方法处理,可以诱导建立感受态。 第五章微生物的遗传 基因的转移和重组 转 导 (Transduction) 利用噬菌体为媒介,将供体菌的部份转移到受体菌内的现象。绝大多数细菌均有噬菌体,转导作用较普遍。 可分为普遍性转导 和局限性转导。 第五章微生物的遗传 基因的转移和重组 1、普遍性转导 普遍性转导是当噬菌体装配时偶然出现的错误,是替代噬菌体DNA包装了一段与噬菌体DNA长度大致相等的细菌DNA。这种“误包”的转导噬菌体,能侵染新的宿主(受体),并注入此段DNA。 普遍性转导噬菌体包括许多温和噬菌体和某些烈性噬菌体。 第五章微生物的遗传 基因的转移和重组 在受体菌中的可能存在状况: 若携带的是细菌染色体DNA,可能与受体细胞内染色体通过遗传重组,整合到受体菌染色体上; 若携带的是质粒DNA,可能会在受体细胞中自我复制而稳定保留下来; 若携带含转座子的DNA片段,可能整合到受体细胞染色体或质粒上。 普遍性转导 第五章微生物的遗传 基因的转移和重组 2、局限性转导 以某些溶源性噬菌体为媒介,只能使供体的一个或少数几个基因转移到受体的转导作用。 第五章微生物的遗传 基因的转移和重组 通常当一个噬菌体被诱导后,以非常精确的方式从染色体上切离形成一个完全的噬菌体基因组。极少数的原噬菌体发生不精确的切离(误切),邻近噬菌体位点上的一小段染色体被切离,而一小段噬菌体的DNA遗留在染色体上。 gal bio gal bio gal bio gal bio bio gal 局限性转导 原噬菌体 第 二 章 微 生 物 形 态 之细胞核及质粒 F质粒与接合 质粒的类型 1、致育因子(fertility factor, F因子) 又称F质粒,一种与大肠杆菌的类似有性生殖现象(接合作用)有关的质粒。 携带F质粒的菌株称为F+菌株(相当于雄性),F质粒的菌株称为F-菌株(相当于雌性)。 F质粒整合到宿主细胞染色体上的菌株称为高频重组菌株, 简称Hfr) * * * 第五章微生物的遗传 第一节 概 述 第二节 微生物的变异 与遗传重组 第五章微生物的遗传 第一节 概 述 一、与之相关的几个概念 二、微生
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