结核病实验室诊断技术新进展.pptVIP

结核病实验室诊断技术新进展; 1、细菌学方法 2、免疫学方法 3、分子生物学方法 ;;根据《伯杰氏细菌鉴定手册》M.TB分为四型;（一）、形态与染色;（二）、菌体成分;好吃、懒做;好吃、懒做; （三）生物学特性 1、条件性—需氧，37℃，特殊培养基—肺 2、懒惰性—生长慢，无运动能力 ; 四个特性： 1、条件性—需氧，37℃，特殊培养基—肺 2、懒惰性—生长慢，无运动能力 ;一个结核菌进入人体后的繁殖情况; 四个特性： 1、条件性—需氧，37℃，特殊培养基—肺、骨骼两端 2、懒惰性—生长慢，无运动能力 3、顽固性—抵抗力强 ;四不怕;四怕; ; 四个特性： 1、条件性—需氧，37℃，特殊培养基—肺、骨骼两端 2、懒惰性—生长慢，无运动能力 3、顽固性—抵抗力强 4、变异性—形态、菌落、毒力、免疫原性、耐药性变异 ;1、细菌学方法 （抗酸染色、固体或液体培养） ;痰结核分枝杆菌检查;痰涂片镜检结果;噬菌体裂解试验; 用于痰标本快速检测; 结果观察; ;敏感株结果;耐药株结果;2、免疫学检测技术;结核抗体测定; 酶联免疫吸附 免疫渗滤试验; 结核蛋白芯片检测; ;结核抗体检测适用范围：; 结核抗原测定;检测用的抗原; TB抗原ELISA检测试剂盒;*;3、分子生物学诊断技术;线性探针技术; 杂交试剂;*;MTBDRplus 反应条带(示范);线性探针技术;线性探针技术;基因芯片;基因芯片;*;基因芯片;基因芯片;实时PCR探针熔解曲线法;Wild-type;操作流程;耐药相关基因位点;特 点;MeltProTM 试剂盒临床试验结果;Gene Xpert;操作步骤;特色;GeneXpert;*;*;? 可同时检测患者是否感染结核 所用仪器设备极其简单 63 ℃扩增（避免非特异性扩增) 多对引物（提高特异性和速度）：靶基因6个不同区域，设计4种引物 ?对涂阴培阳病人具有非常高的敏感性和特异性 ?密闭系统(没有污染的风险） ?快速，两小时内即可得到检测结果， ?肉眼观察 ;交叉引物法; 试剂盒A（小盒） CPA玻璃化试剂 DNA提取液 ddH2O(阴性对照) 阳性对照 复溶缓冲液 石蜡油 试??盒B（大盒） 一次性核酸检测装置 备用液泡 ;检测流程;结果的判读;结论;RNA等温扩增法; 特点1.准确? ?高灵敏度: 阳性检出率高于涂片、固体培养、液体培养。? ? ? ? ? ? ?准确度高于“金标准”固体培养。?? ?高特异性: 97.85%~100%。2.快速、简便? ?2小时? 超声波处理结核菌，操作更为简单，易掌握。3.活菌检测----为临床的治疗效果提供参考依据? ?核糖体RNA（rRNA）是结核分枝杆菌活菌的标志。 ;意义：;阳性的意义：阳性表示曾感染结核， 不一定现在患病。 1．一般阳性和中度阳性： ①结核病现症患者。 ②已受结核菌感染但并不意味着发病或患病。 ③卡介苗接种所致变态反应。 ④3岁内未接种卡介苗者提示体内存在结核病灶, 应及时进行结核菌检查、影像学检查、血沉等检查以确定诊断和治疗。 ;2．强阳性： （1）结核病患者。 （2）感染结核菌未发病者。强阳性人群结核病的发病率高，在未找到病变时可作预防性治疗。 3．如果2年内PPD试验结果由阴性（-）转为阳性（+），或反应强度从原来硬结直径10mm增至10mm，提示新近感染过结核菌，或可能存在活动性病灶。 ;预防性抗痨治疗的适应证：;PPD结果的判定：;教学资料结核病实验室诊断技术新进展; 1、细菌学方法 2、免疫学方法 3、分子生物学方法 ;;根据《伯杰氏细菌鉴定手册》M.TB分为四型;（一）、形态与染色;（二）、菌体成分;好吃、懒做;好吃、懒做; （三）生物学特性 1、条件性—需氧，37℃，特殊培养基—肺 2、懒惰性—生长慢，无运动能力 ; 四个特性： 1、条件性—需氧，37℃，特殊培养基—肺 2、懒惰性—生长慢，无运动能力 ;一个结核菌进入人体后的繁殖情况; 四个特性： 1、条件性—需氧，37℃，特殊培养基—肺、骨骼两端 2、懒惰性—生长慢，无运动能力 3、顽固性—抵抗力强 ;四不怕;四怕; ; 四个特性： 1