发酵工程试验指导.docx

L试验 1 K a 的测定方法 L l氧是难溶气体，在 25℃和 1 个大气压下，纯水中溶解度为 0.25 mol/m3 左右。在好氧发酵过程中，氧气由气相传递到液相，为微生物消耗。氧的传递过程限速阻力位液膜阶段，此时 K a 是描述氧的传递性能的重要参数。 l 目的 把握利用亚硫酸盐测定容积氧体积传递系数的方法，了解氧传递在好氧发酵过程中的重要作用。 2 原理 22 3 4以 Cu 离子为催化剂，溶解于水中的 O 能马上将水中的 SO 2-氧化为 SO 2-， 其氧化反响的速度几乎与 SO32-浓度无关。实际上是 O 一经溶入液相，马上就被 2 2 3 4 Cu Cu 2+ 2Na SO +O 2Na SO 2 3 2 2 4 2 3剩余的 Na SO 2 3 Na SO + I 2 3 2 + H O Na SO 2 2 4 + 2HI 剩余的 I 用标准 Na S O 溶液滴定。 2 2 2 3 I + 2Na S O Na S O +2NaI 2 2 2 3 2 4 6 ??O ~ Na SO ? ? 2 2 3 ~ I ~ Na S O ??2 2 2 3 ? ? 1 2 2 4 2 3 2可见，每溶解 1mol O2，将消耗 2mol Na SO ，将少消耗 2mol I ，将多消耗 2 3 2 Na S 2 2 O 。因此可依据两次取样滴定消耗 Na S2O 的摩尔数之差，计算体积溶氧 233速率。公式如下： 2 3 3 N ? ?VM V 4?tV 0 ? 3600 ? 900?VM ?tV 0 式中 N ：两次取样滴定消耗 Na S O 体积之差， V ：M Na S O ： 2 2 3  浓度， 2 2 3 0? t：两次取样时间间隔，h V ：取样分析液体积。 0 将上述 N 值代入公式k a ? N V 即可计算出 k a V L C * ? C L 由于溶液中 SO3-2 在 Cu2+催化下瞬即把溶解氧复原掉，所以在搅拌作用充分的条件下整个试验过程中溶液中的溶氧浓度 C=0。 在 0.1Mpa(1atm)下，25oC 时空气中氧的分压为 0.021MPa，依据亨利定律， 可计算出C*=0.24mmol/L，但由于亚硫酸盐的存在，C*的实际值低于 0.24mmol/L，因此一般规定 C*=0.21mmol/L。所以 kLa=NV/0.21 亚硫酸钠氧化法的优点是不需专用的仪器，适用于摇瓶及小型试验设备中 kLa 的测定。缺点是：测定的是亚硫酸钠溶液的体积溶氧系数 kLa，而不是真实的发酵液中的 kLa。 试剂 0.1mol/LNa2S2O3 溶液〔需要标定〕，在使用前 1-2 周配置 淀粉溶液：称取 1g 淀粉，放入 100mL 的水中加热搅拌煮沸 2-3min. c.0.05mol/L 的 I2 溶液：称取 30gKI，参加 10mL,溶解，再称取 19.5g 碘搅拌充分溶解，定容 1.5L〔依据试验用量调整〕，避光保存。 d. 0.1mol/L 硫酸铜溶液 仪器 吸管，50mL 三角瓶、酸式滴定管、300-500mL 三角瓶。 试验步骤及方法 测定 Kla 的反响装置，参加适当浓度，如 x mol/L〔0.05~0.45mol/L〕Na2SO3 溶液，每升 Na2SO3 溶液参加 1 ml 0.1mol/L 硫酸铜溶液.。 在通风搅拌后开头计时〔准确秒表〕及间隔准确时间取样时，取样量略少于 2.5/x,以便于取样为准。取样时留意，快速取样 10ml Na2SO3 溶液参加 0.05mol/L 的 I2 溶液 25ml 溶液中。吸管肯定要尽可能的靠近碘液液面 。然后用标准的0.1mol/LNa2S2O3 溶液进展滴定。 试验记录及报告 反响液组成 Na2SO3 ： mol/L 试验条件 反响器名称及 反响液体积 规格  反响温度 转速、确定气压 两次取样间隔 t/s 两 次 滴 定 溶 液Na S O 溶 液 2 2 3 体积差Kla〔1/h〕 Kla〔1/h〕平均值 思考题 实际发酵过程中能否用此法进展测定容积氧传递系数？ 对于几十立方的发酵罐该法是否可行？ 为什么要吸管肯定要尽可能的靠近碘液液面 试验 2 菌体生长动力学参数的求取〔第一局部〕 目的和要求 把握 DNS 法测定复原糖和多糖的方法，绘制出标准曲线。一. 原理 3，5-二硝基水杨酸与复原糖共热后被复原成棕红色的氨基化合物，在肯定范围内复原糖的量和反响液的颜色深度成正比。因此，可利用分光光度计进展比色测定，求得样品的含糖量。 材料与试剂 材料：葡萄糖〔分析纯〕、蒸馏水 1〕以称取 3,5-二硝基水杨酸〔 1〕以称取 3,5-二硝基水杨酸〔 C7H4N2O7 〕6.3 g，氢氧化钠 21.0