细菌的遗传分析.pptxVIP

细菌的遗传分析;细菌和病毒在遗传研究中的优越性;第一节 细菌的细胞和基因组;;细胞结构 细胞膜 拟核 细胞质（核糖体） 细胞壁 （鞭毛 伞毛 荚膜 芽胞） 与真核细胞的差异 缺乏线粒体、叶绿体，无核膜； 染色体 裸露的共价闭合环状双链DNA分子 附加体 小型环状DNA(质粒) 游离或整合状态 ;;细菌遗传的实验研究方法;(一) 细胞计数(培养物细胞浓度);(二) 建立纯系的方法——纯培养;(三) 选择培养法鉴定突变型与重组型;(四) 突变型与重组型的批量筛选方法;影印培养法;影印培养法;;接合 转化 ; 1. 接合现象的发现 1946年 J.Leaderberg和E.Tatum ;单基因突变率 10 –6;原养型的出现 以A、B菌株直接接触为前提;2. F因子及其转移;2. F因子及其转移;2. F因子及其转移;据 F 因子有无以及存在状态 E.Coli 有三种类型： F﹣ 不含有 F 因子 ;F + × F﹣ →;Hfr×F﹣→; 有4个大肠杆菌菌株1、2、3 和 4 的基因型均为a＋b－,另外4个菌株5、6、7和8的基因型为a－b＋,将两种不同基因型的菌株充分混合后进行平板培养，以确定a＋b＋重组子的频率。在以下结果中，M表示许多重组子，L表示少量重组子，O表示无重组子，请根据下述结果，指出每一菌株的性别类型（Hfr、F＋还是F-）;;3. 中断杂交试验及染色体作图;步骤:;第29页/共76页;Lac gal ton azi;Hfr;Hfr;有4个大肠杆菌的Hfr菌株按以下顺序转移其标记基因： 菌株 基因转移顺序 M Z X W C L A N C W A L B R U Z M U R B 上述所有Hfr 菌株都衍生于同一F+菌株，这些基因在原始菌株的环状染色体上排列顺序如何？;据 F 因子有无以及存在状态 E.Coli 有三种类型： F﹣ 不含有 F 因子 ;接合时： ⑴ Hfr菌株的基因是按一定的线性顺序依次进入 F﹣菌株的。 ⑵ 基因位点离原点越近，进入F﹣越早，重组机会越多；反之越晚。 ⑶ F 因子插入的位置不同，使不同的Hfr菌株有自己稳定的转移起点和次序。; 从A到E为源于同一大肠杆菌F＋菌株的5个Hfr株，括号内的数字示中断杂交试验的5个基因进入F－受体菌所需的时间：;;4. 细菌重组与E.Coli???色体作图;;;;;第43页/共76页;第44页/共76页;二. 性导;F′lac F′lac tsx ;比较F′、F+和Hfr可知 F′因子的特点： ⑴ 是细胞质因子，可携带1至多个紧密连锁的基因。 ⑵ 高频率转移它的基因 ( 如同F因子)。 ⑶ 有极高的自然整合率，且整合到细菌染色体一定 的 座位上。;F′因子的主要用途;F + × F﹣ →;三. 转化;转化的发现 1928年，F.Griffith 肺炎双球菌;转化的条件： ⑴ 感受态的受体细胞 ⑵ 转化因子DNA的大小、形态和浓度 ⑶ 受体和供体染色体的同源性;转化过程;第54页/共76页;F＝ ×100％＝58.8%;供体菌株 trp+ his+ tyr+ 受体菌株 trp- his- tyr-;;四. 转导;;;2. 普遍性转导（一般性转导）;2. 普遍性转导（一般性转导）;两个基因距离越近，并发转导的可能性越大; 在大肠杆菌中，thr和leu两个基因在细菌基因组中相距约为2%，试问这两个基因能否用P1噬菌体进行并发转导？为什么？ 如果能，其频率如何？;普遍性转导与作图; 在以P1噬菌体进行的普遍性转导系统中，供体菌株的基因型为pur＋nad＋pdx－,受体菌为pur－nad－pdx＋。转导后，首先选择供体等位基因pur＋ ，然后针对其他等位基因对其中50个pur＋转导子进行筛选，结果如下;大肠杆菌供体 trpA+ supC+ pyrF+ 受体 trpA- supC- pyrF-; （1） supC+ trpA+ pyrF+ 36 （2） supC+ trpA+ pyrF- 114 （3） supC+ trpA- pyrF+ 0 （4） supC+ trpA-