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第35讲
基因工程与生物技术的安全性及伦理道德;(1)基本原理
①原理:利用DNA、RNA、蛋白质和脂质等在
方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
②DNA的性质:DNA不溶于 ,但某些蛋白质溶于 ;DNA能溶于2 mol·L-1的 。
③DNA的鉴定:在一定温度下,DNA遇 试剂会呈现蓝色。;沸水;例1.下列利用洋葱进行“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是( )
A.将研磨液加入切碎的洋葱,充分研磨后过滤,要弃去上清液
B.采用体积分数为95%酒精溶液析出DNA的方法可去除部分杂质
C.用塑料离心管是因为用玻璃离心管容易破损
D.将白色丝状物溶解在NaCl溶液中,加入二苯胺试剂后振荡,观察颜色变化;例2.下图是“DNA的粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图。下列相关叙述不正确的是( )
A.选用植物细胞提取DNA
时需先研磨破碎细胞
B.图2所示实验操作中有一
处明显错误,可能导致试管
2中蓝色变化不明显
C.图1所示操作的原理是DNA
不能溶于酒精,而蛋白质等杂
质能溶于酒精
D.图2试管1的作用是证明物质的量浓度为2 mol/L的
NaCl溶液遇二苯胺试剂出现蓝色;(1)实验基础
①PCR原理:利用了 原理,通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合。
②电泳:DNA分子具有可解离的基团,在一定的pH下,这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下,这些带电分子会向着与它所带电荷 的电极移动,这个过程就是电泳。
③PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的 等有关。;(2)PCR实验操作步骤;(3).PCR技术的过程;强化.(2020·江苏卷,33)如果已知一小段DNA的序列,可采用PCR的方法,简捷地分析出已知序列两侧的序列,具体流程如图;(3)若如表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物,步骤Ⅲ选用的PCR引物必须是________(从引物①②③④中选择,填编号);例3.利用PCR可以在体外进行DNA片段的扩增,下列有关“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的相关叙述,错误的是( )
A.PCR实验中使用的微量离心管、枪头和蒸馏水等在使用前必须进行高压蒸汽灭菌处理
B.PCR利用了DNA的热变性原理
C.PCR所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后,迅速融化
D.在向微量离心管中添加反应组分时,每吸取一种试剂后,移液器上的枪头都必须更换;例4.利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。下列叙述错误的是
A.用PCR方法扩增目的基因
时不必知道基因的全部序列
B.设计引物时需要避免引物
之间形成碱基互补配对而造
成引物自连
C.复性温度过高可能导致
PCR反应得不到任何扩增产物
D.第四轮循环产物中同时含有引物A和引
物B的DNA片段所占的比例为15/16;第一轮;第三轮;例5.(2022·扬州市高三期中)实时荧光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸检测,其原理是:在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团,新链延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法错误的是 ( );下列说法错误的是( )
A.做RT-PCR之前,需要先根据cDNA的核苷酸序列合成引物和探针
B.RNA不能作为PCR扩增的模板,故需要将样本中的RNA逆转录为DNA后再进行扩增
C.若检测结果有强烈荧光信号发出,说明被检测者没有感染病毒
D.病毒的检测还可以检测病毒表面的物质或病毒引发产生的抗体,其原理都是抗原—抗体杂交;(3)DNA的电泳鉴定; ①为避免外源DNA等因素的污染,PCR实验使用的微量离心管、枪头和蒸馏水等在使用前必须进行 处理。
②每吸取一种试剂后,移液器上的 都必须更换。
③电泳时,DNA分子的相对分子质量越大,受到的阻力越 ,迁移速率越 ,DNA分子的相对分子质量越小,受到的阻力越 ,迁移速率越 。;PCR技术和DNA复制的比较;强化. 苯丙酮尿症是由PH基因编码的苯丙氨酸羟化酶异常引起的一种遗传病。已知人群中染色体上PH基因两侧限制酶MspⅠ酶切位点的分布存在两种形式(图1)。一对夫妻婚后生育了一个患有苯丙酮尿症的孩子,②号个体再次怀孕(图2)。为确定胎儿是否正常,需要进行产前诊断,提取该家庭所有成员的DNA经Ms
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教师资格证持证人
专注于中小学各科教学多年,曾获青年岗位能手荣誉称号; 教育局评为县级优秀教师; 2013在全省高中思想政治优秀设计评选活动中荣获一等奖; 在全市高中优质课大赛中荣获一等奖; 第十一届全国中青年教师(基教)优质课评选中荣获二等奖; 2017年4月全省中小学教学设计中被评为一等奖2018年被评为市级教学能手
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