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自体血小板活化对临床血小板输注效果的影响 血小板是血液的重要组成部分，也是身体止血和凝血过程中的一个重要组成部分。随着许多疾病的血小板减少，需要向血小板中静脉注射以减少或防止出血。因此，血小板聚集在临床上占很大比例。机采血小板因其纯度高、容量小、疗效好、来源于单一献血者等优点在临床上得到广泛应用。但目前血小板来源紧张，反复输注易产生抗血小板同种异型抗体，出现血小板输注的无效状态。采用自体血小板输注是解决这些问题的方法之一，但自体血小板需要一定时间的保存，如何提高自体血小板的体外保存的存活率，并维持血小板的活性功能，一直是研究的热点。我们于2008年7月～2011年7月对30例急性白血病患者进行了36例次自体血小板采集保存，6例次血小板保存时间达5d，血小板计数正常者不计入观察对象，对5d保存期内30例次血小板保存前后的活化指标CD62p、CD63及血小板输注前后计数进行检测，分析血小板活化水平变化，探讨其对临床输注效果的影响。 材料和方法 一、 仪器和试剂 采用美国COBE Speatra血细胞分离机，对30例急性白血病患者化疗前血小板计数≥100×10 三、 血小板输注效果 30例次自体血小板保存时间达5d，血小板≤70×10 1．观察临床止血效果，（患者1周内须未使用过影响血小板功能的药物）；2．输注保存自体血小板前及输注后24h内对患者外周血进行血小板计数；3．血小板输注效果采用血小板回收率（Percenfage platelet reco ery, PPR）和血小板计数增高指数（corrected count increment, CCI）来评价。输注血小板后24h若PPR20%或CCI4.5×10 六、 统计处理 结果 一、 采集血小板，保存5dcd6p和cd63水平测试结果 二、 注射前后血小板计数的比较 三、 血小板英雄注射效果 四、 注射个人血小板后止血效果 血小板无效输注的安全问题 目前，化疗仍然是治疗急性白血病最主要的手段，随着化疗强度不断增大和造血干细胞移植的开展，急性白血病的疗效有明显改善，但化疗所致的骨髓抑制，可导致血小板减少，甚至引起严重的出血死亡，血小板输注已成为化疗后支持治疗过程中的关键环节。然而目前除血小板供应紧张外，反复输注异体血小板还会产生血小板的无效输注，我国目前尚无较好的办法解决这一问题。国外的办法有：血小板浓缩液中的白细胞去除、血小板交叉配合试验、血小板的紫外线B照射法及酸处理法等，这些方法烦杂、费时、或价格昂贵。近年来有的采用自体血小板输注来解决这一问题 综上所述，我们认为急性白血病化疗后在骨髓抑制阶段输注保存5d内的自体血小板是一有效、安全、可行的办法，即可避免异体血小板输注产生的血小板抗原不相合的无效输注，又可节约异体血小板输注的用量，缓解血小板供求紧张矛盾。 美国BD公司流式细胞仪FACSclobur（临床型），CD62p、CD63单抗标准品均购自美国BD公司，COBE Spectra血细胞分离机（美国）, 国产XHZ-Ⅲ型血小板恒温震荡保存箱，血小板采集保存袋（美国COBE公司），ACDA抗凝剂（上海输血技术有限公司），CD1800全血细胞分析仪。 二、 cd62p、cd3单抗标准品检测 取血小板保存袋中血小板液各50ul分别于两试管内，分别加入CD62p、CD63单抗标准品各20ul混匀避光，孵育15min后加溶血素1ml, 1 000转离心10min，去上清液，PBS洗3次，100 ulPBS悬浮，上机检测分析。 四、 血小板注射时间和症状 五、 cd62p及cd3 血小板保存前及输注前CD62p、CD63活化指标均数比较及自体血小板输注前后血小板计数均数比较均采用t检验。 30例次血小板采集后及保存5d检测结果示：CD62p、CD63水平随着时间延长，表达率显著升高（P0.001）。见表1。 30例次急性白血病患者自体血小板保存5d输注后24h内检测，血小板计数多有不同程度升高，输注前后血小板计数均数比较有统计学意义（P0.05）。见表2。 30例次保存5d自体血小板输注中，有效输注16例，有效率53.3%。 30例次急性白血病化疗后血小板下降并出血者14例，主要为下肢瘀点，其中3例有鼻衄或齿龈出血。输注保存5d自体血小板后，出血有不同程度减轻7例，有效率50%。