DB37_T 2292-2013刺参（种质）.pdf

ICS 65. 150B 51DB37山長东省地方标准DB37/T2292—2013刺参 (种质布2013-05-01实施山东省质量技术监督局发布 DB37/T 言本标准按GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由山东省海洋与渔业厅提出。本标准由山东省渔业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省海洋水产研究所。本标准主要起草人：孙国华、刘丽娟、任利华、姜向阳、宋秀凯、孙伟、姜会超。I DB37/T 2292—2013表B.4银染液配制方法名称剂量硝酸银（AgNO.)1 g37%甲醛3 nl.超纯水定容至1 L 9 DB37/T参（种质）1范围本标准规定了刺参（Apostichopusjaponicus）的名称与分类、主要形态特征、生长与繁殖、分子遗传学特性及检测方法。本标准适用于刺参的种质检测与鉴定2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 18654. 1养殖鱼类种质检验第1部分检验规则GB/T 18654. 2养殖鱼类种质检验第2部分抽样方法3名称与分类3. 1学名刺参（Apostichopusjaponicus）3.2分类棘皮动物门(Echinodermata)，海参纲（Holothuroidea），韬手目（Aspidochirota），刺参科(Stichopodidae），仿刺参属（Apostichopus）4主要形态特征4. 1外部形态特征4. 1.1体呈编的围筒形，两端稍细，横断面略呈四角形。成参体长一股20cm40cm。口在前端，偏于腹面，肛门在后端，偏于背面。口周生有20个循状触手。背、侧面有大小不一、排列不规则的4列纵向肉刺。体色呈黄褐、黑褐、绿褐、纯白或灰白等。体壁分为5个步带区和5个间步带区，彼此相间排列。腹面平坦，管足密集，排成不规则的3条纵带。4. 1. 2刺参外部形态见图1。I DB37/T 2292—2013图1刺参外部形态4.2内部构造特征4. 2. 1体壁由角质层、表皮、结缔组织和无数小型骨片组成，4.2.2肌肉层由环肌和纵肌组成，外层为环肌，P内层为纵肌，纵肌5束。4.2.3消化系统由口、咽、食道、胃、肠和排泄腔组成。4.2.4循环系统由血管、血窦和围血系统组成，血液透明呈淡褐色4.2.5石灰环咽部周围有由5个辐片和5个间辐片构成的石灰环。4.2.6波里氏囊体内具有一呈圆形、圆形或长瓶形的波里氏囊，5生长与繁殖5.1生长通常在人工养殖条件下不同年龄组测参的体长和体重情况见表1表1不同年龄组刺参全长和体重的实测值12345体长，m42~7892~164156~230196~274205~346体重，g7. 4~25. 778. 4~255. 2238. 1~453. 5343. 9~565. 6384. 9~561. 05.2繁殖2 DB37/T 2292—20135.2.1性成熟年龄刺参雌雄异体，雌性和雄性个体均在2龄左右性成熟。5.2.2性腺发育周期刺参的生殖周期为一个周年，分为以下5个周期：体止期：性腺呈透明细终状，量极少：b)增殖期：性腺多呈无色透明或淡黄色：c)生长期：包括发有1期和2期。发有1期性腺逐渐增粗，分支增多，呈查黄或浅橘红色。发育2期性腺迅速发育，颜色变深，雌雄明显可辨：d)成熟期：精巢呈乳黄色，卵巢呈橘红色、半透明状，卵粒清晰可见：e)排放期：出现自然排精、产卵现象。排放期后性腺退化进入休止期。5.2.3产卵量成熟雌参可排邮1次～3次，可持续30min以上，产卵量一般在100万粒～200万粒，大个体可超1000万粒。6分子遗传学特性6.1微卫星位点6.1.1刺参群体30个个体中5个微卫星位点PCR扩增多态图谱见图2、图3、图4、图5和图6，微卫星位点扩增引物及条件见7.3.1。250bpl250br100b100b图2微卫星位点Ajssr01扩增图谱013456825580100b图3微卫星位点Ajssr02扩增图谱 DB37/T 22920E图4微卫星位点Ajssr03扩增图谱00图5微卫星位点Ajssr04扩增图谱260p图6微卫星位点Ajssr05扩增图谱6.1.25对微卫星引物在刺参群体中共扩增获得23个等位基因，每个微卫星座位检测到的等位基因数为3个～7个。群体的观测杂合度的平均值为0.4759，多态信息含量平均值为0.52493。6.216SrRNA序列6.2.1采用PCR技术对刺参线粒体16SrRNA(核糖体16SrRNA)基因片段进行PCR扩增，引物序列见7.3.2.2，并将获得序列进行测序，获得